摘要：目的 探讨MST1敲除减弱丹酚酸B（salvianolic acid B，Sal B）抑制pERK抗肾纤维化作用。方法 体外实验用XMU-XP-1(10 μmol·L-1)抑制剂刺激人肾皮质近曲小管上皮细胞（HK-2）；体内实验用DEN/CCl4/C2H5OH（DCC）诱导野生型（WT）和MST1全身性基因敲除小鼠(MST1-/-)肾纤维化模型，用Sal B(15 mg·kg-1·d-1，ig)干预。HE和Masson染色观察肾组织病理情况；Western blot检测α-SMA和pERK蛋白表达；免疫荧光法检测pERK蛋白表达。结果 体外结果表明Sal B可以抑制pERK蛋白表达。体内结果表明Sal B可以改善DCC诱导的肾组织病理损伤，抑制α-SMA、pERK蛋白表达；MST1-/-加重病理损伤，明显上调α-SMA、pERK蛋白的表达。结论 Sal B通过抑制ERK蛋白的磷酸化，降低XMU-MP-1对HK-2细胞的刺激作用；Sal B通过抑制α-SMA蛋白、ERK蛋白的磷酸化从而发挥抗肾纤维化的作用；并且MST1-/-，加重肾组织病理损伤，明显上调α-SMA、pERK蛋白的表达，进而减弱Sal B的抗肾纤维化作用。
文章目录
1 材料与方法
1.1 实验动物和细胞
1.1.1 细胞株
1.1.2 实验动物
1.2 实验试剂
1.3 实验仪器
1.4 方法
1.4.1 细胞培养和药物干预
1.4.2 细胞免疫荧光染色
1.4.3 动物造模及给药
1.4.4 HE染色
1.4.5 Masson染色
1.4.6 Western blot
1.4.7 动物免疫荧光染色
1.4.8 统计学方法
2 实验结果
2.1 XMU-MP-1抑制HK-2细胞中MST1蛋白水平验证
2.2 Sal B通过抑制ERK蛋白的磷酸化降低XMU-MP-1对HK-2的刺激
2.3 小鼠肾组织MST1敲除效果蛋白水平验证
2.4 HE染色检测Sal B对DCC诱导小鼠肾组织损伤病理学的影响
2.5 Masson染色检测 Sal B对DCC诱导小鼠肾纤维化的病理学影响
2.6 α-SMA蛋白的表达
2.7 MST1基因敲除激活ERK的磷酸化，减弱Sal B治疗肾纤维化过程中对ERK蛋白磷酸化的下调能力
3 讨论
