摘要:目的:观察二陈汤对肥胖型抑郁模型小鼠的疗效,并探究其作用机制。方法:将C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组、二甲双胍(0.65 g kg-1)组和二陈汤低、中、高剂量(3.35、6.7、13.4 g kg-1)组,造模同时灌胃给药,连续28 d。通过行为学、肝脑指数、肝功能、血脂指标和肝、脑组织病理学改变评价二陈汤疗效;采用RNA-seq技术对小鼠肝组织进行转录组学分析,筛选差异基因,对其进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析;通过Western blot和Real-time PCR法对筛选出的关键基因进行实验验证。结果:行为学、肝功能、血脂指标和肝、脑组织病理学改变均显示二陈汤对肥胖型抑郁模型小鼠具有治疗作用;转录组学KEGG 通路富集分析表明二陈汤干预肥胖型抑郁模型小鼠均显著富集于PPAR信号通路;WB及Real-time PCR验证结果表明,与模型组比较,二陈汤低、中、高组小鼠肝组织中的脂肪酸结合蛋白(FABP)1 蛋白及mRNA表达显著下降(P<0.01),酰基辅酶A氧化酶(ACOX)1、过氧化物酶体增值物激活受体(PPAR)ɑ、胆固醇7α-羟化酶(CYP7A)1、磷酸烯醇式丙酮酸羧基酶(PCK)1 蛋白及mRNA表达显著升高(P<0.05)。结论:二陈汤对肥胖型抑郁具有一定疗效,其作用机制与调控PPAR信号通路及相关基因FABP1、ACOX1、PPARɑ、CYP7A1、PCK1表达有关。
文章目录
1 材料
1.1 动物
1.2 药物
1.3 试剂
1.4 仪器
2 方法
2.1 造模
2.2 分组与给药
2.3 行为学检测
2.3.1 糖水实验
2.3.2 旷场实验
2.4 肝脏指数与脑指数测定
2.5 肝功能与血脂生化指标检测
2.6 HE染色观察肝组织与脑组织病理改变
2.7 转录组测序分析
2.7.1 文库建立
2.7.2 参考基因组比对
2.7.3 差异基因
2.7.4 差异基因聚类
2.8 免疫印迹法及Real-time PCR法进行靶点
2.9 统计学分析
3 结果
3.1 行为学检测结果