摘要:目的:探究补肾健脾方(BSJP)调控卵巢储备功能下降(DOR)大鼠血管生成的影响。方法:环磷酰胺单次腹腔注射制备DOR大鼠模型,随机分为模型组、西药组[芬吗通0.204 mg/(kg·d)]及BSJP等量组[6.43 g/(kg·d)]、BSJP高量组[12.85 g/(kg·d)],给药15天。观察动情周期;检测体质量和生殖脏器指数;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、抗米勒管激素(AMH)含量;苏木精-伊红(HE)染色观察卵巢病理结构;免疫组织化学法检测卵巢低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达;蛋白质印迹法(WB)和实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测卵巢HIF-1α、VEGF表达。结果:模型组大鼠动情周期紊乱,FSH、LH水平、HIF-1α蛋白表达、HIF-1αmRNA表达量升高(P<0.05,P<0.01),E2、AMH无差异(P>0.05),VEGF蛋白表达、VEGF mRNA表达量降低(P<0.01)。各给药组较模型组,FSH、LH水平下降(P<0.05),HIF-1α m RNA表达量下降(P<0.01);西药组和BSJP高量组HIF-1α蛋白表达降低、VEGF蛋白表达、VEGF mRNA上调(P<0.01);BSJP等量组VEGF mRNA表达量升高(P<0.05)。结论:BSJP可能通过激活HIF-1α/VEGF通路改善卵泡内部缺氧状态,调控血管生成,从而治疗环磷酰胺造模对大鼠卵巢储备功能的影响。
文章目录
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 动物
1.1.2 药物
1.1.3 试剂与仪器
1.2 方法
1.2.1 分组与模型制备
1.2.2 检测指标与方法
1.2.2.1 大鼠动情周期
1.2.2.2 大鼠卵巢脏器指数、输卵管脏器指数、子宫脏器指数
1.2.2.3 ELISA检测大鼠血清性激素
1.2.2.4 HE染色观察大鼠卵巢形态结构
1.2.2.5 免疫组织化学法检测卵巢组织HIF-1α、VEGF蛋白表达
1.2.2.6 蛋白质印迹法(Western Blotting,WB)法检测卵巢组织HIF-1α、VEGF蛋白表达
1.2.2.7 实时定量聚合酶链反应(Quantitative Real-time PCR,qPCR)法检测各组大鼠卵巢HIF-1α、VEGF基因表达
1.3 统计学方法
2 结果
2.1 BSJP对DOR大鼠动情周期的影响
2.2 大鼠卵巢脏器指数、输卵管脏器指数、子宫脏器指数的比较
2.3 ELISA法检测各组大鼠血清中FSH、LH、E2、AMH水平
2.4 HE染色观察各组大鼠卵巢