摘要：为探究广叶绣球菌提取物（Sparassis latifolia extracts，SLE）抑制黑色素生成的有效成分及作用机制，本研究运用气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）和网络药理学方法进行检测和分析。体外细胞实验显示，SLE对小鼠黑色素瘤细胞B16F10的存活未产生显著影响，能够显著抑制黑色素的生成。GC-MS分析得到SLE主要成分41个；通过TCMSP、PubChem、GeneCards数据库获取SLE成分对应靶点576个及黑色素生成相关靶点2 692个，联合分析获得共有靶点198个；通过STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白质互作网络，筛选出100个关键靶点。利用DAVID数据库完成GO和KEGG富集分析，获得蛋白质结合、细胞质等460个GO条目和磷脂酰肌醇3激酶-丝氨酸/苏氨酸激酶（phosphatidylinositol 3 kinase-serine/threonine kinase，PI3K-AKT）、丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）信号通路等161个KEGG通路。构建“成分-靶点-通路”网络图，筛选出关键成分及核心靶点并且通过AutoDock Tools软件对其进行分子对接，结果显示关键成分与核心靶点结合力良好。综上，SLE显著抑制黑色素生成，其机制可能是通过关键成分亚油酸、烟酰胺等调节PI3K-AKT、MAPK等信号通路中的多个核心靶点，为进一步研究作用机制提供了理论依据。
文章目录
1材料与方法
1.1材料
1.1.1供试材料
1.1.2仪器和试剂
1.2方法
1.2.1广叶绣球菌提取物样品制备
1.2.2细胞培养与传代
1.2.3 细胞增殖与胞内黑色素含量测定
1.2.4 SLE的GC-MS分析
1.2.5 SLE潜在作用靶点的收集
1.2.6黑色素瘤相关靶点的收集及共同靶点的筛选
1.2.7共同靶点蛋白互作网络构建
1.2.8 GO和KEGG通路富集分析
1.2.9“成分-靶点-通路”网络构建与分析
1.2.10分子对接
1.2.11数据分析
2 结果
2.1 SLE对黑色素瘤细胞B16F10的抑制作用
2.1.1 SLE对黑色素瘤细胞B16F10增殖的影响
2.1.2 SLE对黑色素瘤细胞B16F10黑色素生成的影响
2.2 SLE成分GC-MS分析
