摘要：目的 探讨枳椇总三萜提取物增强A549/DDP细胞对顺铂敏感性的作用机制。方法 基于ARE-Nrf2荧光素酶报告基因，检测枳椇总三萜提取物对A549/DDP细胞中Nrf2表达的影响；应用Westernblot法检测用药后对细胞中Keap-1/Nrf2/HO-1、Nrf2-GPX4通路蛋白、凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的影响；通过Nrf2激活剂/抑制剂进一步验证其对Nrf2靶标的影响。结果 枳椇总三萜能增强A549/DDP细胞对顺铂的敏感性，调控凋亡蛋白Bax、Bcl-2表达，抑制A549/DDP细胞中Keap-1/Nrf2/HO-1/GPX4通路，诱导铁死亡。结论 枳椇总三萜通过诱导Nrf2介导的铁死亡途径，增强A549/DDP细胞对顺铂的敏感性。
文章目录
1 材料
1.1 H-TP的制备
1.2 细胞株
1.3 试剂
1.4 仪器
2 方法
2.1 抗氧化响应元件（antioxidant response element，ARE）荧光素酶报告基因检测
2.2 细胞活力检测
2.3 细胞凋亡检测
2.4 Western blot检测相关蛋白表达
2.5 统计学分析
3 结果
3.1 H-TP对ARE荧光素酶活性的影响
3.2 H-TP对A549、A549/DDP耐药性的影响
3.3 H-TP诱导A549/DDP细胞Nrf2依赖性死亡
3.4 H-TP增强A549/DDP细胞铁死亡
3.5 H-TP促进A549/DDP细胞凋亡
4 讨论
