摘要：目的：研究哈蟆油改善慢性疲劳综合征（chronic fatigue syndrome，CFS）的作用机制。方法：本研究采用TCMSP、BATMAN、GeneCards等数据库以“哈蟆油”和“CFS”为关键词筛选相关活性成分及作用靶点，利用分子对接评估其活性成分与靶点的结合能力。同时，采用力竭游泳和慢性束缚交替应激实验制备CFS小鼠模型，给予不同剂量哈蟆油混悬液（800、400、200 mg/kg）灌胃两周后，检测小鼠血清、肌肉、肝脏和脑组织中的生化指标及炎症因子表达，考察哈蟆油对CFS的改善作用。结果：实验共筛选出5个符合条件的活性成分和8个改善CFS的核心靶点，其中，哈蟆油改善CFS的作用与IL17/TRAF6信号通路相关。进一步分子对接结果表明，哈蟆油中的菜油甾醇（Campesterol）可能是发挥抗疲劳作用的主要成分。体内动物实验结果表明，哈蟆油对CFS模型小鼠具有显著的治疗效果，能够有效改善其行为学指标和生理生化异常。在行为学方面，与模型组相比，给药组小鼠的体重和饮食量显著增加，糖水偏好率明显提高（P<0.01或P<0.05）。通过多项行为学测试发现：在强迫游泳实验（FST）和悬尾实验（TST）中，给药组小鼠的不动时间显著缩短（P<0.01）；在旷场实验（OFT）中，运动速度、运动总距离和站立次数均显著增加（P<0.01或P<0.05）；在水迷宫实验（MWM）中，逃避潜伏期明显缩短，同时运动距离和目标象限停留时间显著延长（P<0.01或P<0.05）。在生化指标检测结果显示，给药组小鼠的尿素氮（BUN）、IL-6、TNF-α、COX2和MDA水平显著降低，而SOD和GSH-Px活性明显升高（P<0.01或P<0.05）。此外，肌肉组织中乳酸含量也显著降低（P<0.01或P<0.05）。Western blot结果显示，给药组小鼠体内IL-17A、TRAF6、ACT1、TAK1、IKKβ、IκBα、NF-κB、C/EBPβ关键信号蛋白的表达水平均显著下调（P<0.01或P<0.05），同时下游炎症因子IL-6、TNF-α和COX2的表达也明显降低（P<0.01或P<0.05）。这些结果表明，哈蟆油可能通过抑制IL-17/TRAF6/NF-κB信号通路的活化，减轻氧化应激和炎症反应，从而改善CFS症状。结论：哈蟆油通过调控IL17/TRAF6信号通路改善CFS，为CFS的临床治疗提供了新的思路。
文章目录
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
1.2 实验方法
1.2.1 哈蟆油有效成分及靶点筛选和疾病相关靶点的获取
1.2.2 哈蟆油-疲劳-成分-靶点网络的构建和网络拓朴学分析
1.2.3 蛋白互作网络（PPI）构建、GO功能富集和 KEGG通路分析
1.2.4 成分结构绘制和分子对接
1.2.5 动物实验分组，造模和给药
1.2.6 观察指标
1.2.6.1 一般状态观察和行为学检测
1.2.6.2 生化指标检测
1.2.6.3 蛋白免疫印迹检测相关蛋白指标
1.3数据处理
2 结果与分析
2.1 网络药理学和分子对接结果
2.1.1 哈蟆油的活性成分及相关靶点和CFS相关靶点
2.1.2 药物-疾病-成分-靶点构建和PPI网络以及网络拓朴学分析
2.1.3 哈蟆油治疗 CFS的 GO 富集和 KEGG 通路分析
2.1.4 分子对接结果
2.2 哈蟆油对CFS小鼠的基本状况和行为学的影响
2.3 生化分析结果和蛋白免
