摘要:本研究以云南白茶(Yunnan white tea extract,Y-WTE)和福建白茶(Fujian white tea extract,F-WTE)两种不同产地来源的白茶提取物为研究对象,系统地评估并比较了他们的抗氧化和抗黑色素生成活性。通过DPPH自由基清除率、羟基自由基清除率、MTT细胞活力测定以及对H2O2诱导的人包皮成纤维细胞(human foreskin fibroblast,HFF-1)氧化损伤模型的修复作用,评估了两种白茶提取物的体外抗氧化活性。同时,通过酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)活性测定、NaOH法黑色素含量测定、mRNA表达水平测定和蛋白免疫印迹分析,探究白茶提取物对小鼠黑色素瘤细胞B16黑色素生成的影响及分子机制。研究结果表明,在生化水平上和在H2O2诱导的HFF-1细胞氧化损伤模型中,两种白茶提取物均表现出一定的抗氧化活性,并且Y-WTE的抗氧化能力显著优于F-WTE。在抗黑色素生成方面,两种白茶提取物在B16细胞中均能显著抑制α-促黑素(α-melanocyte-stimulating hormone,α-MSH)介导的黑色素生成,其作用机制与下调黑色素生成相关关键蛋白小眼转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)、TYR和TYR相关蛋白1(TYR-related protein 1,TYRP1)的mRNA表达水平,以及抑制TYR酶活性和蛋白表达密切相关。本研究系统揭示了不同产地白茶提取物的抗氧化和抗黑色素生成功效,证实了白茶提取物在化妆品、食品或生物医药领域具有潜在的应用价值,为白茶的功能性开发利用提供了理论依据。
文章目录
1 材料与方法
1.1 材料和仪器
1.1.1 实验材料与试剂
1.1.2 细胞系
1.1.3 实验仪器
1.2 实验方法
1.2.1 白茶提取物提取工艺
1.2.2 DPPH自由基清除率的测定
1.2.3 羟基自由基清除率的测定
1.2.4 白茶提取物对HFF-1细胞氧化损伤模型的修复作用
1.2.5 生化水平TYR抑制率的测定
1.2.6 MTT测定细胞活力
1.2.7 细胞水平TYR抑制率的测定
1.2.8 黑色素含量测定
1.2.9 实时荧光定量PCR
1.2.10 蛋白免疫印迹
1.2.11 数据统计方法
2 实验结果
2.1 白茶提取物的抗氧化效果研究
2.1.1 DPPH自由基清除率
2.1.2 白茶提取物的羟基自由基清除率
2.1.3 白茶提取物对氧化损伤细胞的修复作用
2.2 白茶提取物抗黑色