背景:既往研究表明淫羊藿苷具有良好的促成骨分化潜能,但存在药物易流失、易降解、难以持续作用等缺点。目的:制备载有淫羊藿苷微球的三维支架,探索最佳载药浓度。方法:分离培养出兔骨髓间充质干细胞,通过检测细胞表型和多向分化能力进行鉴定。采用复乳溶剂挥发法制备淫羊藿苷载药微球,将其加入丝素蛋白/壳聚糖/纳米羟基磷灰石混合溶液中,通过真空冷冻干燥化学交联法制备含不同浓度(0,0.1,1,10,50,100μmol/L)淫羊藿苷的载药支架。通过CCK-8法、细胞活死染色、细胞划痕实验、茜素红染色、碱性磷酸酶染色、免疫印迹法检测含不同浓度淫羊藿苷缓释微球的三维支架对骨髓间充质干细胞增殖活性、迁移、成骨分化的影响。结果与结论:(1)CCK-8法及细胞活死染色实验显示载淫羊藿苷缓释微球的三维支架能促进骨髓间充质干细胞增殖,细胞活性增加,以10μmol/L淫羊藿苷组效果最佳(P <0.05);(2)茜素红染色、碱性磷酸酶染色结果显示10μmol/L淫羊藿苷组矿化结节、成骨分化能力高于对照组(P <0.05);(3)Western bolt显示淫羊藿苷促进了Ⅰ型胶原、骨钙素、Runt相关转录因子2、血管内皮生长因子蛋白表达,其中以10μmol/L淫羊藿苷组上调显著(P <0.05)。结果显示,10μmol/L淫羊藿苷为最佳载药缓释浓度。