摘要:[目的]为研究中药复方对复发性口腔溃疡(ROU)模型大鼠的药效及作用机制,[方法]首先采用液质联用(LC-MS)法对中药复方中化学成分进行定性分析,接着将35只SD大鼠随机均分为阳性药物对照组(20 mg·kg-1左旋咪唑)、中药复方低(15 mg·kg-1中药)、高(45 mg·kg-1中药)剂量组、模型组、空白对照组。除空白组外,其余四组均采用免疫化学联合诱导法建立大鼠ROU模型,然后,各组分别连续给药7 d。给药期间每日拍照记录大鼠溃疡恢复情况及大鼠体重和采食量,给药结束后,立即处死大鼠,制备大鼠口腔溃疡组织切片,观察大鼠口腔溃疡愈合情况;酶联免疫吸附法检测大鼠血清中炎性相关因子的含量;免疫组化法检测大鼠溃疡组织VEGF蛋白含量的表达;水溶性四唑蓝法、硫代巴比妥酸法和比色法检测溃疡组织中氧化应激相关因子的含量;高通量测序法检测大鼠盲肠粪便微生物种类的丰富度。[结果] 造模成功后,与空白组相比,造模的四组大鼠体重均显著降低(P<0.05),造模四组之间无明显差异;给药结束后,与空白组相比,模型组大鼠体重及采食量显著降低,溃疡明显;溃疡组织中VEGF表达量显著降低;血清中IL-6、TNF-α水平显著升高(P<0.05);溃疡组织中SOD、GSH-PX含量下降,MDA含量显著升高(P<0.05);大鼠粪便微生物菌群失调;与模型组比较, 中药复方组大鼠体重及采食量显著升高(P<0.05);溃疡组织愈合明显;溃疡组织中VEGF表达量明显提高;血清中炎性因子水平显著下调(P<0.05),溃疡组织中SOD、GSH-PX含量显著升高(P<0.05);MDA含量显著降低(P<0.05);大鼠粪便微生物菌群平衡恢复,在门水平上,厚壁菌门平均相对丰度下降,趋近于空白对照组。[结论]上述结果表明,免疫化学联合诱导法成功建立大鼠复发性口腔溃疡模型;中药复方具有抗炎、抗氧化、促进溃疡组织血管生长,调节肠道微生物菌群进而促进ROU大鼠溃疡恢复的作用。
文章目录
1材料
1.1主要试剂与仪器
1.2药物提取
1.3 实验动物
2方法
2.1中药复方中化合物鉴定
2.1.1样本处理
2.1.2上机检测
2.2动物分组、造模及给药
2.2.1动物分组
2.2.2动物造模
2.2.3动物给药
2.3检测指标
2.3.1大鼠体重及采食量变化
2.3.2大鼠溃疡组织愈合状况变化
2.3.3溃疡组织病理学观察
2.3.4大鼠口腔黏膜组织均浆制备
2.3.5免疫组化检测
2.3.6大鼠血清中炎症相关因子含量测定
2.3.7大鼠溃疡组织中氧化应激相关因子含量测定
2.3.8大鼠肠道微生物组测定