摘要：目的 研究茯苓三种活性成分对秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,C.elegans, N2线虫)寿命和应激能力的影响及机制,初步探究茯苓抗衰老的潜力。方法 采用溶剂法提取茯苓中水溶性多糖、酸性多糖和三萜;评估3种活性成分对N2线虫寿命、抗应激、生殖能力和运动能力以及活性氧(reactive oxygen species, ROS)和脂褐素水平的影响;采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(quantitative reverse transcription polymerase chain reaction, qRT-PCR)测定衰老相关基因的表达。结果 与空白组相比,500μg/mL水溶性多糖组、62.5μg/mL酸性多糖组和500μg/mL茯苓三萜组的N2线虫寿命分别延长12.72%、15.07%和12.55%,并增强其抗氧化应激能力(P<0.05);酸性多糖和三萜能提高N2线虫在热应激和紫外应激状态下的生存率,降低N2线虫体内ROS水平,差异有统计学意义(P<0.05)。3种活性成分可显著降低N2线虫体内脂褐素水平(P<0.05),并不影响其产卵量和运动能力(P>0.05)。茯苓3种活性成分可通过上调daf-16和ctl-2 mRNA及下调daf-2和age-1 mRNA的表达,延长N2线虫寿命。结论 茯苓3种活性成分在N2线虫中表现出抗氧化和抗衰老的作用,其机制可能与调控胰岛素/胰岛素样生长因子1信号通路中衰老相关基因的表达有关。
文章目录
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
1.1.1 实验材料
1.1.2 主要试剂
1.1.3 主要仪器
1.2 方法
1.2.1 茯苓3种活性成分的分离
1.2.2 茯苓3种活性成分含量测定
1.2.2.1 多糖含量测定
1.2.2.2 三萜含量测定
1.2.3 试剂配制
1.2.4 N2线虫培养
1.2.5 N2线虫同步化
1.2.6 N2线虫氧化损伤实验
1.2.7 N2线虫寿命实验
1.2.8 急性热应激实验
1.2.9 急性紫外应激实验
1.2.10 生殖能力实验
1.2.11 N2线虫咽泵运动实验
1.2.12 N2线虫身体摆动运动实验
1.2.13 N2线虫体内ROS水平检测
1.2.14 N2线虫脂褐素水平的测
