摘要:为研究沙棘果油中不饱和脂肪酸对溃疡性结肠炎的影响,本文以沙棘果油为原料,利用尿素包埋法对沙棘果油中棕榈油酸等不饱和脂肪酸进行富集,以得到不含棕榈酸的沙棘果油提取物。在单因素基础上,响应面实验确定最佳包埋条件,为沙棘果油制备高不饱和脂肪酸提取物提供参考。用脂多糖(LPS)刺激RAW 264.7细胞,建立细胞炎症模型,研究沙棘果油提取物的抗炎活性。用CCK-8法检测沙棘果油提取物对细胞存活率的影响,用ELISA试剂盒测定沙棘果油提取物对细胞炎症因子白细胞介素-6(IL- 6)和白细胞介素-10(IL- 10)分泌量影响。结果表明,优化后的最佳工艺条件为包埋时间12.49 h,V溶剂︰m尿素=3.99︰1,m尿素︰m底物=1.95︰1。该条件下所得产物的产品得率为63.68%,棕榈油酸纯度为37.76%;40 μg/mL及以下质量分数的沙棘果油提取物对细胞存活率无显著性作用,160 μg/mL和80 μg/mL的沙棘果油提取物可显著提高细胞活性。沙棘果油提取物对IL-6和IL-10的表达具有剂量依赖性抑制作用。
文章目录
1 材料与仪器
1.1试剂与材料
1.2 主要仪器和设备
2 试验方法
2.1 沙棘果油中棕榈油酸的富集
2.1.1 混合脂肪酸的制备
2.1.2 尿素包埋法富集棕榈油酸
2.2 气相色谱质谱分析沙棘果油中棕榈油酸的含量
2.2.1 游离脂肪酸的甲酯化
2.2.2 气相色谱条件
2.2.3 质谱条件
2.3 响应面优化实验
2.4 LPS诱导的RAW 264.7细胞炎症模型建立
2.4.1 溶液配置
2.4.2 细胞培养
2.4.3 CCK-8法检测细胞活力
2.4.4 细胞内IL-6及IL-10含量测定
2.4.5 数据分析
3 结果与分析