摘要：研究加味小建中汤（modified Xiaojianzhong decoction，MXD）及其组分芍药苷（paeoniflorin，PF）、桂皮醛（trans-cinnamaldehyde，TCA）对慢性轻度不可预知性应激（chronic unpredictable mild stress，CUMS）大鼠的行为学改善作用以及对海马线粒体损伤及铁死亡相关蛋白的影响。实验将50只SPF级SD大鼠随机分为空白组（control group，Con；n=7）和造模组（n=43），造模组大鼠应用CUMS法造模4周，剔除造模失败的大鼠8只，造模成功的大鼠随机分为模型组（model group，Mod；n=7）、MXD组（n=7）、PF组（n=7）、TCA组（n=7）和氟西汀组（n=7），各组大鼠按规定剂量灌胃4周，同时继续造模。药物干预结束后进行强迫游泳实验（forced swimming test，FST）和旷场实验（open field test，OFT）。酶联免疫吸附测定法检测血清超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）和丙二醛（malondialdehyde，MDA）变化；试剂盒检测海马组织活性氧自由基（reactive oxygen species，ROS）、线粒体呼吸链酶复合体I（mitochondrial respiratory chain complex Ⅰ，complex Ⅰ）、complex III的表达；蛋白免疫印迹法检测海马区铁死亡的相关蛋白环加氧酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4（long chain fatty Acyl-CoA synthetase 4，FACL-4）、铁蛋白和谷胱甘肽过氧化物酶4（glutathione peroxidase 4，GPX4）的表达量。结果显示，Mod组出现大鼠FST不动时间增加，OFT运动距离和时间减少，MXD及其组分减少了CUMS大鼠的FST不动时间，增加了大鼠在旷场内的运动距离和时间；与Con组比较，CUMS大鼠血清SOD水平下降，MDA水平上升，MXD组、PF组、TCA组大鼠血清SOD水平升高，MDA水平降低；与Con组比较，Mod组大鼠海马组织ROS水平上升，与Mod组比较，MXD组、PF组、TCA组ROS水平降低；与Con组比较，Mod组大鼠海马区complex I、complex III水平明显降低；与Mod组相比，MXD组、PF组、TCA组complex I、complex III水平升高；与Con组比较，Mod组海马FACL-4、COX-2表达水平明显升高，铁蛋白重链1（ferritin heavy polypeptide 1，FTH-1）、GPX4表达水平明显下降，与Mod组相比，MXD组、PF组、TCA组FACL-4、COX-2表达水平显著下调，FTH-1、GPX4表达水平显著升高。由此可得出结论，MXD及其组分可以改善抑郁症大鼠的行为学改变，其作用机制可能与抑制海马区神经元铁死亡，抑制氧化应激反应，改善线粒体功能有关。
文章目录
1 材料与方法
1.1 实验动物
1.2 药物、试剂和仪器
1.3 分组、造模和给药
1.4 强迫游泳实验
1.5 旷场实验
1.6 透射电镜观察线粒体超微结构
1.7 酶联免疫吸附测定法检测血清SOD和MDA的表达
1.8 化学荧光法检测海马ROS的水平
1.9 Complex I、complex III的检测
1.10 蛋白免疫印迹法检测铁死亡相关蛋白
1.11 统计学方法
2 结果
2.1 FST不动时间比较
2.2 OFT总运动距离、活动时间和运动轨迹比较
2.3 海马CA3区线粒体超微结构变化
2.4 各组大鼠血清SOD、MDA水平变化
2.5 各组大鼠海马ROS、complex I和complex III水平变化
2.6 各组大鼠海马铁死亡相关蛋白表达水平情况
3 讨论与结论
