摘要：冬虫夏草是主产于我国青藏高原的传统药材，但因其较高的砷含量备受安全性质疑。本研究通过对比冬虫夏草提取液和等砷含量的不同价态无机砷（12.3 μg/g）对人肝星形细胞LX-2的活性、氧化损伤、内源性凋亡通路的影响，初步探讨其安全性。本文通过CCK-8法、生化试剂盒、流式细胞术分别检测细胞活性、抗氧化酶活性、细胞凋亡率；使用荧光探针法检测细胞活性氧含量；Western blot检测氧化应激和凋亡相关蛋白的表达量。结果显示，冬虫夏草提取液组对细胞活性、活性氧、丙二醛含量、抗氧化酶活性、核因子E2相关因子2（nuclear factor E2-related factor 2，NRF2）通路蛋白表达量、乳酸脱氢酶释放量和细胞凋亡率均无显著影响。而等砷含量三价砷、五价砷和混合无机砷组的细胞活性显著降低至85.9%、51.6%和60.4%，通过激活内源性凋亡途径促进细胞凋亡；引起细胞氧化损伤，细胞内活性氧和丙二醛含量显著增加，抗氧化酶——过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性降低，并抑制NRF2通路蛋白的表达。综上，冬虫夏草提取液未对细胞造成损伤，为其安全性研究提供了实验依据。
文章目录
1 材料与方法
1.1材料与试剂
1.2 仪器与设备
1.3 实验方法
1.3.1 冬虫夏草提取液的制备
1.3.2 细胞培养
1.3.3 分组及给药
1.3.4 细胞活性检测
1.3.5 LDH检测
1.3.6 MDA检测
1.3.7 抗氧化酶活性检测
1.3.8 活性氧检测
1.3.9 细胞凋亡率检测
1.3.10 NRF2通路蛋白、凋亡通路蛋白检测
1.3.11 统计学方法
2 结果
2.1 冬虫夏草提取液对LX-2细胞活性的影响
2.2 冬虫夏草提取液对LX-2细胞氧化损伤的影响
2.3 冬虫夏草提取液对LX-2细胞抗氧化酶的影响
2.4 冬虫夏草提取液对LX-2细胞损伤
