摘要:为提高木犀草素(LUT)在胶质母细胞瘤治疗中的细胞毒性和肿瘤靶向性,开发了一种基于外泌体的仿生递送系统。采用超速离心法从U251细胞的条件培养基中提取U251细胞外泌体(U251-Exos),并通过超声法将LUT包载于U251-Exos中,成功获得U251-Exos@LUT,再利用透射电子显微镜(TEM)、蛋白质印迹法(Western Blot)等对其进行表征。结果显示,U251-Exos@LUT呈扁平的球形,平均粒径为132.73 nm,且保留了外泌体的表面标记蛋白Alix、TSG101和CD81,证实了外泌体的完整性和LUT的成功负载。体外实验结果显示,U251-Exos@LUT组的细胞存活率仅为7.1%,能够有效抑制细胞的增殖,其抗肿瘤作用与调控GPX4/SLC7A11信号通路相关。体内药效实验进一步表明,相较于LUT组,U251-Exos@LUT组的肿瘤发光强度降低约2.7倍,并将小鼠的生存期延长6 d。此外泌体递送系统的构建为胶质母细胞瘤的精准治疗开辟了新的方向。
文章目录
1材料与仪器
1.1材料
1.2仪器
1.3 实验动物
2方 法
2.1 网络药理学分析
2.1.1木犀草素靶点的获取
2.1.2疾病相关靶点的收集
2.1.3交集靶点的筛选
2.1.4 PPI构建
2.1.5分子对接验证
2.2 U251-Exos的提取
2.3 U251-Exos@LUT的制备
2.4 U251-Exos和U251-Exos@LUT的表征
2.4.1 外观形态表征
2.4.2 粒径表征
2.4.3 Western Blot表征
2.4.4 U251-Exos@LUT的溶血性考察
2.5 U251-Exos@LUT的包封率和载药量的测定
2.6 U251-Exos细胞摄取能力的考察