六味地黄丸合二至丸对NETs共培养4T1细胞EMT特征的影响

2025-07-24 30 1.92M 0

  摘要:目的:探讨六味地黄丸合二至丸含药血清对与中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)共培养条件下三阴性乳腺癌4T1细胞上皮间充质转化(EMT)的调控作用,以及对乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响。方法:采用C57小鼠提取中性粒细胞,用佛波醇12-十四酸酯13-乙酸酯(PMA)诱导成NETs,并运用Western Blot检测NETs标志物Cit H3的表达。69只SPF级昆明小鼠随机分为六味地黄丸(11.7 g/kg)组、二至丸(36.9 g/kg)组、六味地黄丸合二至丸(35.1 g/kg)组,每组各23只,灌胃相应药物5 d后取血分离血清。实验设空白对照组、模型组、紫杉醇组、六味地黄丸含药血清组、二至丸含药血清组、六味地黄丸合二至丸含药血清组,CCK-8法检测细胞增殖活力;细胞划痕试验和Transwell侵袭实验分别检测4T1细胞的迁移和侵袭;免疫荧光实验检测Cit H3、MPO表达;Western Blot检测EMT相关蛋白和HMGB1/TLR4信号轴相关蛋白表达。结果:成功诱导NETs,建立NETs-4T1共培养体系。与空白对照组比较,模型组细胞增殖活力和迁移、侵袭能力显著升高,E-cadherin蛋白表达显著降低,CitH3、MPO荧光强度和N-cadherin、Vimentin、TLR4、HMGB1蛋白表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较,各给药组细胞增殖活力和迁移、侵袭能力显著降低,E-cadherin蛋白表达显著升高,CitH3、MPO荧光强度和N-cadherin、Vimentin、TLR4蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。六味地黄丸合二至丸的作用显著优于单用六味地黄丸或二至丸。结论:六味地黄丸合二至丸以通过抑制NETs,调控HMGB1/TLR4信号通路抑制4T1细胞EMT特征表达,抑制4T1细胞的迁移和侵袭。



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