近年来,海氏肠球菌在奶牛隐性乳房炎病例中检出率逐渐上升。为深入探究海氏肠球菌致病性和耐药性,本试验通过细菌学、形态学及分子生物学方法自奶牛隐性乳房炎阳性乳样中成功分离得到一株海氏肠球菌,并命名为:EH-GY8。对该菌进行了生长特性检测、耐药性测定,以及全基因组测序和小鼠攻菌建模研究。结果显示,EH-GY8为G+球菌,呈γ-溶血特征,其对数生长期为2~7 h;最适生长条件为30℃、pH值=7,基因组大小达2 747 743 bp;该菌对万古霉素和左氧氟沙星耐药。动物试验发现,攻菌组血常规指标显著升高(P<0.05),乳腺组织中存在大量菌体,乳腺腺泡结构损坏,上皮细胞脱落、乳腺间质充血严重并有大量炎症细胞浸润,相关炎性因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)表达显著升高(P<0.05),并呈先升后降趋势,攻菌第3天为病程发病期。本研究对海氏肠球菌的发病机制进行了深入探讨,为奶牛隐性乳房炎及相关疾病的防治提供了重要的研究基础和理论支撑。