生长激素释放激素受体（GHRHR）表达于垂体细胞表面，调节垂体生长激素合成与分泌，对动物生长发育发挥重要调控作用。为深入了解GHRHR对五指山猪生长发育的影响，研究通过CRISPR-ctRNP体外酶切试验，筛选出切割效率达27.3%的1条gRNA用于构建CRISPR-Cas9表达载体。转染五指山猪肾细胞后，经流式分选富集到编辑效率高达100%的细胞群体作为供体细胞，进行体细胞核移植，再将250枚克隆胚胎转移至5头代孕母猪输卵管中，最终1头代孕母猪成功妊娠，分娩3头克隆仔猪均为GHRHR双等位基因编辑个体，编辑均导致GHRHR基因产生移码突变，可导致蛋白翻译提前终止，丧失生物学功能。最终仅有1头GHRHR编辑五指山猪存活，该个体60日龄时，体重较野生型个体平均体重下降23.4%。研究在五指山猪中实现GHRHR基因高效编辑，为培养微型宠物猪及解析GHRHR的调控功能提供理论依据。
