目的：明确宫颈癌细胞分泌的外泌体源性miR-23a-3p对肿瘤相关巨噬细胞极化方向的影响，探究宫颈癌细胞迁移及侵袭行为的机制。方法 纳米颗粒跟踪分析、透射电镜观察和Western-blot鉴定宫颈癌细胞分泌的外囊泡是否为外泌体。建立佛波酯（PMA）诱导急性单核细胞白血病细胞（THP-1）成巨噬细胞模型，免疫荧光检测巨噬细胞摄取外泌体情况。巨噬细胞添加Si Ha/HeLa分泌的外泌体处理或转染miR-23a-3p mimics/miR-23a-3p inhibitors处理后，RT-qPCR、Western-blot检测巨噬细胞标志物表达水平；荧光素酶报告基因验证miR-23a-3p与PTEN 3’-UTR的结合能力。宫颈癌细胞与巨噬细胞利用Transwell小室共培养，检测宫颈癌细胞的迁移及侵袭能力在Si Ha/HeLa分泌的外泌体处理或转染miR-23a-3p mimics前后的差异。结果：经过纳米颗粒跟踪分析、透射电镜和Western-blot检测外泌体标志蛋白后确认宫颈癌细胞分泌的外囊泡为外泌体，并且发现Si Ha/HeLa分泌的外泌体源性miR-23a-3p表达较细胞内高。利用PMA诱导THP-1细胞分化成巨噬细胞，通过免疫荧光观察到巨噬细胞能够摄取外泌体。RT-qPCR检测巨噬细胞摄取外泌体后，M2型标志物TGF-β、CD206、Argians-1表达较非摄取组明显升高（P(27)0.05），而M1标志物i NOS表达较之减少（P(27)0.05）。巨噬细胞转染miR-23a-3p mimics处理后，得到同样的结果。通过体外宫颈癌细胞和巨噬细胞共培养发现，肿瘤源性外泌体或转染miR-23a-3p mimics诱导的M2型巨噬细胞可使宫颈癌细胞迁移及侵袭增加（P(27)0.05）。双荧光素酶报告基因检测发现，外泌体源性miR-23a-3p能结合到巨噬细胞内PTEN的3’-UTR，影响PTEN表达。Western-blot检测发现，巨噬细胞转染miR-23a-3p mimics后PTEN表达水平下降（P(27)0.05），且下游p-AKT增加（P(27)0.05）；反之，转染miR-23a-3p inhibitors后PTEN表达增加（P(27)0.05），且p-AKT磷酸化降低（P(27)0.05）。结论：宫颈癌细胞分泌的外泌体源性miR-23a-3p诱导巨噬细胞M2型极化，通过下调M2型巨噬细胞PTEN激活AKT信号通路，从而增强宫颈癌细胞迁移及侵袭能力。
