摘要：目的 采用慢速冷冻方法,以首都医科大学附属北京妇产医院生育力保护中心标准冻融方案,评估人卵巢组织冻融过程对卵巢组织的影响。方法 将12例患者的卵巢组织分为新鲜卵巢组织组和冻融卵巢组织组,冻融方案为本中心标准方案,通过苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)和钙黄绿素AM(calcein acetoxymethylester,calcein-AM)染色进行卵泡计数并评估卵泡活性,免疫组织化学法标记Ki-67和caspase-3的阳性率,评估细胞增殖和凋亡情况,Western blotting法比较两组在caspase-3、bax、FasL等凋亡相关蛋白的表达。结果 采用本中心标准冻融方案,卵巢组织冻融前后在卵泡计数和卵泡活性方面差异无统计学意义(P>0.05);卵巢组织冻融后细胞Ki-67阳性率低于新鲜卵巢组织(P<0.05),差异有统计学意义;两组caspase-3阳性率差异无统计学意义(P>0.05);冻融后caspase-3蛋白表达量高于新鲜卵巢组织,差异有统计学意义(P<0.05);而bax和Fas L等凋亡相关蛋白的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 采用本中心标准冻融方案,能够很好地保持卵巢组织内的卵泡数目、形态和活性,冻融后细胞增殖水平降低,不增加冻融后bax和Fas L等凋亡相关蛋白的表达,caspase-3的表达量相对增加,是较好的人卵巢组织冻融方案。
