摘要：【目的】探究糙皮侧耳蛋白质N-糖基化修饰对高温胁迫的响应，揭示其在糙皮侧耳抵抗高温胁迫中的功能。【方法】分析高温胁迫（42 ℃）下糙皮侧耳菌丝总蛋白和甘露糖蛋白质量分数、糖供体和蛋白质N-糖基化中间代谢物质量分数及蛋白质N-糖基化修饰通路关键基因表达情况；研究糙皮侧耳菌丝在衣霉素(蛋白质N-糖基化修饰抑制剂)处理后总蛋白和甘露糖蛋白质量分数变化情况，并以潮霉素(多肽链合成抑制剂)处理为对照，比较衣霉素和潮霉素处理后的糙皮侧耳菌丝经高温胁迫24 h后的恢复生长情况。【结果】随着高温胁迫时间延长，糙皮侧耳菌丝全细胞总蛋白质量分数逐渐升高，全细胞甘露糖蛋白、细胞壁总蛋白和甘露糖蛋白质量分数逐渐降低。经高温胁迫24 h后，糖供体GDP-甘露糖和UDP-N-乙酰葡萄糖胺及长萜醇二磷酸质量分数分别为对照的36.9倍、5.2倍和3.5倍，蛋白质N-糖基化修饰中间代谢物长萜醇磷酸和β-1，4-D-甘露糖基壳二糖基多萜醇质量分数分别为对照的0.23倍和0.06倍，蛋白质N-糖基化修饰关键基因alg1、alg7、alg13和alg14的表达量分别为对照的0.13倍、0.59倍、0.28倍和0.07倍。衣霉素处理显著降低了糙皮侧耳全细胞甘露糖蛋白质量分数、细胞壁总蛋白和甘露糖蛋白质量分数。经衣霉素处理的糙皮侧耳菌丝在高温胁迫后，其恢复生长速率显著高于对照，这与潮霉素处理相反。【结论】糙皮侧耳通过降低蛋白质N-糖基化修饰水平提高其对高温胁迫的抗性。
文章目录
1 材料和方法
1.1 供试菌株
1.2 培养基与试剂
1.3 主要仪器设备
1.4 高温胁迫处理糙皮侧耳菌丝总蛋白和甘露糖蛋白质量分数测定
1.4.1 高温胁迫糙皮侧耳菌丝样品制备
1.4.2 糙皮侧耳菌丝细胞壁提取
1.4.3 甘露糖蛋白和总蛋白质量分数测定
1.5 糙皮侧耳菌丝蛋白质N-糖基化修饰相关代谢物质量分数分析
1.6 糙皮侧耳蛋白质N-糖基化修饰关键基因相对表达量分析
1.7 蛋白质N-糖基化修饰在糙皮侧耳抵抗高温胁迫中的功能分析
1.7.1 衣霉素处理下糙皮侧耳菌丝总蛋白和甘露糖蛋白质量分数测定
1.7.2 高温胁迫下糙皮侧耳菌丝不同处理恢复生长情况对比
1.8 数据处理与分析
2 结果与分析
2.1糙皮侧耳菌丝总蛋白和甘露糖蛋白对高温胁迫的响应
2.2糙皮侧耳菌丝蛋白质N-糖基化修饰相关代谢物对高温胁迫的响应
2.3 糙皮侧耳菌丝蛋白质N-糖基化修饰关键基因表达量对高温胁迫的响应
2.4 蛋白质N-糖基化修饰在糙皮侧耳抵抗高温胁迫中的功能
2.4.1衣霉素处理对糙皮侧耳菌丝甘露糖蛋白质量分数的影响
2.4.2衣霉素和潮霉素处理对高
