摘要：目的：探讨吡非尼酮对三阴性乳腺癌4T1细胞增殖、迁移和侵袭能力影响的机制。方法：培养三阴性乳腺癌4T1细胞株，将不同浓度吡非尼酮（2、4、6、8 mmol/L）处理4T1细胞作为药物处理组，未加吡非尼酮处理4T1细胞为对照组。Western blot检测芳胺N-乙酰转移酶1（Arylamine N-acetyltransferase 1，NAT1）蛋白的表达；CCK-8实验和克隆形成实验检测吡非尼酮对三阴性乳腺癌4T1细胞的增殖能力；划痕实验和Transwell迁移实验检测吡非尼酮对三阴性乳腺癌4T1细胞的迁移能力；Transwell侵袭实验检测吡非尼酮对三阴性乳腺癌4T1细胞的侵袭能力；分子对接验证吡非尼酮与NAT1之间相互作用。结果：与对照组相比，吡非尼酮在8 mmol/L浓度时显著抑制NAT1的蛋白表达（P<0.000 1）；与对照组相比，2、4、6、8 mmol/L吡非尼酮处理三阴性乳腺癌4T1细胞的增殖、迁移、侵袭能力逐渐减弱，具有浓度依赖性；其中，吡非尼酮浓度为8 mmol/L时显著抑制了三阴性乳腺癌4T1细胞的增殖、迁移与侵袭（P<0.001）；此外，分子对接显示，吡非尼酮与NAT1之间存在氢键及疏水相互作用。结论：8 mmol/L吡非尼酮通过抑制NAT1蛋白表达进而降低三阴性乳腺癌4T1细胞增殖、迁移和侵袭能力。
文章目录
1 材料与方法
1.1 主要试剂
1.2 细胞培养
1.3 检测方法
1.3.1 PFD药物作用后4T1细胞形态变化
1.3.2 Western blot检测PFD作用4T1细胞后NAT1蛋白的表达
1.3.3 CCK-8法检测PFD对4T1细胞增殖能力的影响
1.3.4 克隆形成实验检测PFD对4T1细胞增殖能力的影响
1.3.5 划痕实验检测PFD对4T1细胞迁移能力的影响
1.3.6 Transwell迁移实验检测PFD对4T1细胞迁移能力的影响
1.3.7 通过Transwell侵袭实验评估PFD对4T1细胞侵袭能力的影响
1.4 分子对接验证
1.5 统计学处理
2 结果
2.1 PFD作用三阴性乳腺癌4T1细胞的形态变化
2.2 PFD抑制三阴性乳腺癌4T1细胞NAT1的蛋白表达
2.3 PFD抑制三阴性乳腺癌4T1细胞的增殖
2.3.1 通过CCK-8实验检测PFD对4T1细胞的增殖能力
2.3.2 通过克隆形成实验检测PFD对4T1细胞的增殖能力
2.4 PFD对三阴性乳腺癌4T1细胞迁移的显著抑制作用
2.5 不同浓度PFD抑制4T1细胞的迁移
