摘要：目的 研究层状双氢氧化物（LDH）负载si-NEAT1对乳腺癌紫杉醇耐药及肿瘤相关巨噬细胞极化作用的分子机制。方法qRT-PCR、Western blotting检测乳腺癌亲本细胞（SKBR3）和紫杉醇耐药乳腺癌细胞（SKBR3-PR）中LncRNA NEAT1、miR-133b和PD-L1的表达；设置实验分组Control、si-NEAT1、miR-133b mimics,qRT-PCR、Western blotting检测SKBR3-PR中MRP、BCRP和PD-L1的表达，划痕、Transwell检测增殖迁移能力，流式细胞术检测细胞凋亡；采用si-NEAT1和miR-133b inhibitor进行Rescue实验；肿瘤细胞上清（CM）与巨噬细胞共培养，设置实验分组PBS、IL-4、PBS+SKBR3 CM、PBS+SKBR3-PR CM、IL-4+PR si-N CM,qRT-PCR检测M2型巨噬细胞标志物Arg-1、CD163、IL-10与miR-133b、PD-L1的表达，免疫荧光检测CD163与CD206；构建LDH@si-NEAT1纳米载体转染肿瘤细胞，设置分组Control、LDH、游离si-NEAT1、LDH@si-NEAT1,qRT-PCR、Western blotting、免疫荧光检测MRP、BCRP和PD-L1的表达，划痕、Transwell实验检测细胞增殖迁移能力，流式细胞术检测细胞凋亡；LDH@si-NEAT1 CM与巨噬细胞共培养，设置实验分组PBS、IL-4、IL-4+PR@CM,qRT-PCR、免疫荧光检测Arg-1、CD163、IL-10及miR-133b和PD-L1的表达。结果 相较于亲本乳腺癌细胞，紫杉醇耐药乳腺癌细胞中NEAT1表达上调、miR-133b下调和PD-L1上调（P<0.05）;si-NEAT1和miR-133b mimics处理分别显著抑制了紫杉醇耐药乳腺癌细胞的活性，促进了细胞凋亡（P<0.01）,MRP、BCRP表达下调（P<0.05）；敲低NEAT1,miR-133b表达上调，PD-L1表达下调（P<0.01）,MRP、BCRP表达下调（P<0.001）；巨噬细胞M2型极化标志物Arg-1、CD163、IL-10在SKBR3-PR CM与巨噬细胞共培养后表达上调（P<0.05），而si-NEAT1 CM与巨噬细胞共培养后下调（P<0.05）;LDH@si-NEAT1作用肿瘤细胞，迁移侵袭能力下调，凋亡增加（P<0.01）,MRP和BCRP以及PD-L1蛋白的表达降低（P<0.05）,LDH@si-NEAT1CM作用巨噬细胞Arg-1、CD163、IL-10表达下调，miR-133b上调，PD-L1下调（P<0.01）。结论 LDH@si-NEAT1通过靶向miR-133b/PD-L1轴，调控乳腺癌细胞PTX耐药与巨噬细胞极化。
