摘要：目的 比较不同湿度下荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization，FISH）红绿信号的荧光强度，探讨FISH检测中荧光强度对湿度的偏向性。方法 收集乳腺癌组织和肺癌组织标本各9例，每例标本各连续切7张切片，1张行HE染色以确定肿瘤区域，其余6张切片分为两组，每组3张切片，分别滴加两个不同厂家的探针，将每组3张切片分别置于不同湿度中杂交过夜，原位杂交仪的湿条加水量设置为5 ml、15 ml、25 ml，第二天在荧光显微镜下对杂交结果进行计数判读，并利用ImageJ软件对杂交后图像进行平均荧光强度计算，统计荧光原位杂交探针在三个湿度梯度条件下的红绿信号荧光强度，探讨不同湿度对红绿荧光强度的影响。结果 在不同的湿度梯度下两组织样本的杂交检测成功率无统计学差异（P>0.05），但红绿信号在不同湿度下的荧光强度差异有统计学意义（P<0.05），杂交湿度高时红绿荧光信号均较强，杂交湿度低时红绿荧光信号强度均较弱。结论 湿度对红绿荧光信号强度影响较大，在FISH检测过程中要保证杂交过程处于湿润的环境，湿润的杂交条件更利于得到较强的红绿荧光信号，便于计数判读，同时在红色信号较弱时也可适度提高杂交湿度以获得更清晰的杂交结果。
文章目录
1 资料与方法
1.1 仪器与试剂
1.2 方法
1.2.1 组织样本预处理
1.2.2 变性杂交
1.2.3 杂交后洗涤及复染
1.2.4 图像采集与平均荧光度分析
1.2.5 FISH检测成功与否的判断标准[7]
1.3 统计学分析
2 结果
2.1不同湿度杂交条件的FISH检测成功率
2.2 不同湿度杂交条件下红绿信号平均荧光强度比较
3 讨论
