摘要:【目的】乳酸菌(lactic acid bacteria, LAB)是益生菌的主要来源。我国珍贵的地方猪种藏猪的肠道乳酸菌资源仍有待挖掘,本研究旨在筛选优质藏猪源乳酸杆菌。【方法】采用平板划线法分离并通过16S rRNA基因测序鉴定乳酸菌,进一步选择2株乳酸产量有显著差异的藏猪源罗伊氏黏液乳杆菌和1株实验室此前保存杜×长×大(Duroc×Landrace×Yorkshire, DLY)猪源的罗伊氏黏液乳杆菌,共3株菌进行耐酸耐胆盐、抗氧化试验、抑菌能力以及耐药性等生物学特性分析和比较。【结果】成功从藏猪中分离鉴定到21株乳酸菌,分别为10株非解乳糖链球菌(Streptococcus alactolyticus)、6株罗伊氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)(原名为罗伊氏乳杆菌Lactobacillus reuteri)、3株食淀粉乳杆菌(Lactobacillus amylovorus)、1株肠膜状明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)和1株阴道黏液乳杆菌(Limosilactobacillus vaginalis)。在挑选出的3株菌中,L. reuteri T-B5L2的乳酸产量最高,该菌在pH 3.0和0.1%胆盐的培养基中均表现出较强的生存能力,其抑制肠致病性大肠杆菌和猪霍乱沙门菌生长的能力最强。3株菌在抗氧化能力上无显著差异。3株菌均对青霉素类和头孢菌素类抗生素较敏感,对四环素类、氨基糖苷类和糖肽类抗生素有抵抗力。【结论】本研究从藏猪粪便中分离到21株乳酸菌,其中L. reuteri T-B5L2的产酸能力最强,进一步的体外生化特性测定结果表明该菌生长性能良好,具有耐酸、耐胆盐、抗氧化和抑制病原菌生长的能力,表明L. reuteri T-B5L2是一株具有潜力的益生菌。
文章目录
1 材料与方法
1.1 主要试剂和仪器
1.2 样品来源
1.3 试验菌株
1.4 乳酸菌的分离鉴定
1.5 产乳酸能力测定
1.6 生长曲线测定
1.7 生化试验测定
1.8 耐酸、耐胆盐能力测定
1.9 抗氧化能力测定
1.10 抑菌能力测定
1.11 耐药性测定
1.12 乳酸菌中可移动遗传元件(mobile genetic elements, MGEs)基因测定
1.13 数据统计及分析
2 结果与分析
2.1 乳酸菌的分离鉴定及筛选
2.2 15株乳酸菌乳酸产量
2.3 三株Limosilactobacillus reuteri的生长性能
2.4 三株Limosilactobacillus reute