摘要：目的：制备负载GNE-477的酸敏感沸石咪唑骨架-8（zeolitic imidazolate framework-8，ZIF-8）纳米粒（ZIF-8@GNE-477），并探讨其体内外抗骨肉瘤活性。方法：采用ZIF-8作为载体负载GNE-477，表征其物理化学性质，研究其在酸性（pH5.0）和中性（pH7.4）条件的释放特性。细胞实验研究ZIF-8@GNE-47的体外抗增殖、迁移、侵袭活性和促凋亡及其可能机制。BALB/c裸鼠皮下接种MG-63细胞悬液建立骨肉瘤模型，考察ZIF-8@GNE-47对小鼠体质量、肿瘤体积、肿瘤凋亡等影响。此外，检测健康小鼠血液肝肾功能指标及主要脏器病理学变化以评估其安全性。结果：ZIF-8@GNE-477是均一的多面体形态，粒径为（90.67±1.36）nm，7 d粒径保持相对稳定，X射线衍射和紫外-可见光显示GNE-477成功负载在ZIF-8中，载药率和包封率分别为（30.40±0.77）%和（91.19±2.32）%。酸性条件下，ZIF-8@GNE-477能够快速释放GNE-477，72 h内释放达90%。体外实验显示，与游离的GNE-477相比，ZIF-8@GNE-477显著抑制MG-63细胞活力、侵袭迁移能力，并促进细胞凋亡（P<0.05），这与其能显著抑制蛋白激酶B和雷帕霉素靶蛋白的磷酸化表达（P<0.05）密切相关。体内实验显示，ZIF-8@GNE-477组对骨肉瘤生长抑制及促凋亡作用最显著，并具有良好安全性。结论：ZIF-8@GNE-477在肿瘤酸性环境下更好的释放GNE-477，可在体内外提高GNE-477的抗骨肉瘤效果。
文章目录
1 材料与方法
1.1 仪器
1.2 试剂
1.3 动物
1.4 细胞培养
1.5 ZIF-8@GNE-477的合成
1.5.1 ZIF-8的合成
1.5.2 ZIF-8@GNE-477的合成
1.6 ZIF-8@GNE-477的表征
1.7 ZIF-8@GNE-477的药物释放
1.8 CCK-8检测
1.9 克隆形成实验
1.10 Transwell实验
1.11 流式细胞术
1.12 Western blot分析
1.13 皮下荷瘤小鼠模型的构建与分组
1.14 苏木精和伊红（hematoxylin-eosin，H&E）染色和免疫组织化学（immunohistochemistry，IHC）染色
1.15 肿瘤切片的TUNEL检测
1.16 体内安全性研究
1.17 统计学处理
2 结果
2.1 ZIF-8和ZIF-8@GNE-477的表征和药物释放测定
2.2 ZIF-8@GNE-477的体
