秋石斛（Phalaenopsis-type Dendrobium hybrids）是热带地区重要观赏植物，其花形奇特、花色丰富，在花卉市场中具有极高的产业价值。分子育种是突破传统育种局限性的重要手段，筛选标记基因辅助筛选则可以加速转基因进程。为获得适合于秋石斛遗传转化的筛选标记基因和筛选剂，该研究以‘三亚阳光’和‘诺贝尔’的胚性愈伤（ECs）和原球茎为外植体，将其置于含不同浓度卡那霉素、遗传霉素（G418）、潮霉素和双丙氨膦的培养基中，测试其对不同筛选剂的敏感性，观察其生长状态，统计存活率，并以最优筛选标记基因和筛选剂进行遗传转化测试。结果表明：（1）两个品种的外植体对不同筛选剂的敏感性表现一致，即对潮霉素、G418，双丙氨膦较敏感，卡那霉素不敏感，在卡那霉素浓度为700mg·L-1的培养基中外植体仍能正常生长。（2）潮霉素、G418和双丙氨膦的致死浓度分别为30 mg·L-1、50 mg·L-1和7 mg·L-1。（3）hpt为筛选标记基因，潮霉素为筛选剂的初次筛选浓度以30 mg·L-1最佳，随着筛选周期的延长，提高筛选剂浓度有利于获得转基因株系。该研究确定了秋石斛两个栽培种对不同筛选剂的敏感性和最低致死浓度，潮霉素抗性基因（hpt）、新霉素磷酸转移酶基因（npt）和除草剂抗性基因（bar）都可以作为秋石斛遗传转化体系构建的筛选标记基因，对应筛选剂分别为潮霉素、G418和双丙氨膦，同时在遗传转化筛选过程中，筛选剂浓度梯度递增有利于转基因外植体的获得。
