摘要：二氢黄酮醇4-还原酶（Dihydroflavonol 4-reductase，DFR）是花青素合成通路上的关键酶，其表达与花青素积累及花色呈现密切相关。为了探究DFR基因与多星韭（Allium wallichii）花色形成的关系，以紫花和白花多星韭为研究材料，利用RT-PCR技术克隆其DFR基因，并进行表达分析。结果克隆得到4条DFR等位基因，称作AwDFRs，包括紫花中的AwDFR-P1，AwDFR-P2和白花中的AwDFR-W1，AwDFR-W2；AwDFRs基因的开放阅读框均为1155 bp，编码384个氨基酸。序列比对分析表明，AwDFRs蛋白含有完全相同的NADPH保守结构域和底物特异性结合结构域。系统进化树分析表明，AwDFRs蛋白与洋葱DFR亲缘关系最近。qRT-PCR结果显示，AwDFRs在花瓣中的表达量显著高于其他组织，且在粉色、紫色和深紫色多星韭花中，随着花瓣发育和着色过程，AwDFRs的表达量逐渐升高；而在白花多星韭的整个花发育阶段，AwDFRs几乎都不表达。以上结果表明，多星韭花色差异形成的原因可能与AwDFRs基因的差异表达有关。AwDFRs在多星韭花青素合成积累过程中可能扮演着重要角色。
文章目录
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.2 多星韭总RNA的提取及cDNA的合成
1.3 多星韭AwDFRs基因的克隆
1.4 多星韭AwADFRs基因的生物信息学分析
1.5 多星韭AwADFRs基因表达分析
1.6 数据分析
2 结果与分析
2.1 AwDFRs基因克隆
2.2 AwDFRs基因的生物信息学分析
2.3 AwDFRs蛋白的系统进化树分析
2.4 AwDFRs基因表达模式分析
3 讨论与结论
