摘要:目的 探究BNIP3L/NIX调控线粒体自噬对快速老化(SAMP8)小鼠认知障碍的作用。方法 选择快速老化(SAMP8)小鼠和老化抵抗(SAMR1)小鼠各12只,分别给予海马区注射携带BNIP3L-shRNA病毒和NC-shRNA病毒,两种小鼠被随机分为P8+sh-BNIP3L组、P8+NC组、R1+sh-BNIP3L组、R1+NC组,每组6只。RT-PCR检测BNIP3L干扰效率,注射2个月后,采用筑巢实验和Morris水迷宫实验评价各组小鼠认知功能,透射电镜观察海马区细胞线粒体自噬情况,Western blot检测小鼠海马组织BNIP3L、NIX、Atg5、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白的表达。结果 sh-BNIP3L实验组小鼠的海马区BNIP3L mRNA表达降低;P8+sh-BNIP3L组、P8+NC组小鼠筑巢实验评分、穿越平台次数降低,逃避潜伏期、BNIP3L、NIX、Atg5、p62、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ表达、海马区细胞线粒体自噬情况增加。P8+sh-BNIP3L组筑巢实验评分、穿越平台次数高于P8+NC组,逃避潜伏期、BNIP3L、NIX、Atg5、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ表达低于P8+NC组,海马区细胞线粒体自噬情况改善。结论 抑制BNIP3L/NIX信号能改善SAMP8小鼠认知障碍,这可能与其能降低线粒体自噬水平有关。
文章目录
1 材料和方法
1.1主要试剂与仪器
1.2 RT-PCR检测BNIP3L干扰效率
1.3动物分组及处理
1.4 筑巢实验
1.5 Morris水迷宫实验
1.6 透射电镜观察海马区细胞线粒体变化
1.7 Western blot
1.8统计学分析
2 结果
2.1 RT-PCR检测BNIP3L干扰效率
2.2 筑巢实验结果
2.3 Morris水迷宫实验结果
2.4透射电镜检测线粒体自噬情况
2.5 Western blot检测海马组织自噬蛋白的表达
3 讨论