摘要:【目的】探讨分枝横梗霉菌株LYSF001的致病性及其对常见抗真菌药物的耐药性,为动物真菌感染的诊断与治疗提供实验依据。【方法】通过形态学特征和分子生物学技术分离并鉴定菌株;通过PCR技术检测菌株LYSF001的毒力基因,并构建动物感染模型评估其致病性;采用组织病理学检查、GMS染色及ITS序列扩增技术分析感染动物的肝脏和肾脏病理变化;通过药敏试验评估菌株LYSF001对卡泊芬净、两性霉素B和伊曲康唑的敏感性。【结果】菌株LYSF001鉴定为分枝横梗霉;检测出菌株LYSF001携带5个毒力基因CalA、PKP2、LaeA、Alp2和AspF1;该菌株感染小鼠后造成40%死亡率,试验小鼠内脏充血,其中肝脏和肾脏的病理变化最为显著,表现为炎症细胞浸润和组织坏死;GMS染色显示心脏、肝脏中存在深色菌丝,ITS序列扩增进一步证实了真菌感染;药敏试验证实了菌株LYSF001对两性霉素B及伊曲康唑表现出敏感性,然而该菌株对卡泊芬净存在耐药。【结论】本研究证实分枝横梗霉菌株LYSF001具有较强的致病性,可引发动物严重感染甚至死亡;同时,该菌株对两性霉素B和伊曲康唑敏感,但对卡泊芬净耐药。这为动物真菌感染的诊断与治疗提供了重要的实验依据和技术支持。
文章目录
1 材料与方法
1.1 伦理审批声明
1.2 菌株与动物
1.3 菌株分离
1.4 菌株不同温度培养
1.5 基因序列扩增与系统发育分析
1.6 毒力基因检测
1.7 动物实验
1.8 RNA提取与实时定量PCR
1.9 解剖学与组织病理学检查
1.10 透射电子显微镜检查
1.11 GMS染色
1.12 药物敏感性试验
1.13 统计分析
2 结果与分析
2.1 菌株的培养及鉴定
2.2 菌株基因及毒力基因鉴定
2.3 组织病理学检查
2.4 药物敏感性试验
3 讨论
4 结论