摘要：【目的】明确春尺蠖小热激蛋白基因AcinHsp19.8在时空及应对饥饿、低温等外界不利环境中的作用。【方法】基于从春尺蠖转录组数据中获取的基因序列，结合RT-PCR技术克隆得到一条Hsp19.8序列，进行基因序列、蛋白质理化性质分析，并构建系统进化树，同时分析该基因在时空及温度/饥饿胁迫下的表达模式。【结果】克隆获取1条Hsp19.8基因，命名为AcinHsp19.8（Gene Bank登录号：PV053121），CDS全长为549 bp，共编码182个氨基酸，预测分子式为C904H1422N262O276S4，预测分子量为20.51 kDa，预测等电点为6.52；系统进化结果表明，春尺蠖小热激蛋白Hsp19.8与家蚕Bombyx mori、桑螟Glyphodes pyloalis及二化螟Chilo suppressalis的sHsp基因聚类于同一分支，表明其具有较高的同源性。RT-qPCR结果显示，AcinHsp19.8在卵期和幼虫期表达量处于较低水平，在雄虫中表达量达最大值。在成虫发育过程中，雌虫胸和腹部表达量很高，且显著高于雌雄成虫其他组织（P < 0.05）；3龄幼虫在-10℃至25℃范围温度处理下，AcinHsp19.8基因表达量在非回温处理时呈倒“V”字型；回温后除-10℃外，其他温度组表达量均下降；在4℃处理1 h后达最大值；随温度升高，AcinHsp19.8在4龄幼虫表达量呈"N"型波动，30℃时达最大值；4龄幼虫在饥饿处理6～12 h间，AcinHsp19.8基因的表达受抑制，且处于较低水平。【结论】AcinHsp19.8基因可能参与春尺蠖发育调控，并在温度和饥饿应激响应中发挥重要作用。
文章目录
1 材料和方法
1.1 昆虫饲养及处理
1.2 RNA的提取及cDNA第1链的合成
1.3 生物信息学分析
1.4 基因表达
1.5 数据统计与分析
2结果与分析
2.1春尺蠖AcinHsp19.8基因的克隆
2.2 春尺蠖Acin19.8基因的生物信息学分析
2.3 春尺蠖 AcinHsp19.8 基因序列一致性比对及系统进化关系分析
2.4 春尺蠖AcinHsp19.8基因不同发育阶段的表达
2.5 春尺蠖AcinHsp19.8基因在不同组织中的表达
2.6 春尺蠖AcinHsp19.8基因在3龄幼虫低温度胁迫中的表达
2.7 春尺蠖AcinHsp19.8基因在4℃不同时间处理下的表达
2.8 春尺蠖AcinHsp19.8基因在4龄幼虫不同饥饿时间胁迫下的表达
2.9 春尺蠖AcinHsp19.8基因在春尺蠖4龄幼虫不同温度胁迫下的表达
3 讨 论
