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摘要：目的：研究Keap1/Nrf2通路调控的铁死亡在溃疡性结肠炎（Ulcerative Colitis， UC）中的作用机制及溃结宁膏穴位敷贴的干预效果。方法：采用腺嘌呤、冰番泻叶及多周期葡聚糖硫酸钠盐溶液诱导构建脾肾阳虚夹瘀型慢性UC大鼠模型。将成模后大鼠随机分为正常组、模型组、穴位敷贴组、柳氮磺吡啶（SASP）组、Ferrostatin-1（Fer-1）组、非穴位敷贴组及穴位非敷贴组，各组分别干预14天。检测体质量、疾病活动指数（DAI）、结肠黏膜损伤指数（CMDI），观察结肠组织超微结构，并分析肠黏膜屏障蛋白（Occludin、Claudin-1）及铁死亡相关蛋白（SLC7A11、GPX4）、Keap1-Nrf2/HO-1通路关键蛋白的表达水平。结果：与正常组相比，模型组大鼠体重下降，DAI评分升高，结肠缩短，CMDI评分显著增加（P < 0.05）。透射电镜观察显示，模型组结肠组织细胞膜完整性受损，微绒毛结构紊乱，线粒体体积缩小、嵴断裂。与模型组相比，SASP组和穴位敷贴组大鼠病理损伤明显改善，体质量增加，DAI评分降低，结肠长度增加，CMDI评分下降（P < 0.05）；Occludin、Claudin-1表达水平显著上调（P < 0.05）。免疫组化、免疫荧光及WB检测显示，与正常组相比，模型组结肠组织SLC7A11、GPX4显著降低（P < 0.05），Keap1表达升高（P < 0.05），Nrf2、HO-1表达下降（P < 0.05）；而与模型组相比，Fer-1组及穴位敷贴组SLC7A11、GPX4、Nrf2、HO-1表达显著升高，Keap1表达下降（P < 0.05）。结论：溃结宁膏可减轻UC大鼠结肠黏膜病理损伤，其机制可能与激活Keap1-Nrf2/HO-1信号通路、抑制铁死亡有关。
文章目录
1 资料与方法
1.1 动物
1.2 实验药物
1.3 主要试剂及仪器
1.4 造模与分组
1.5 干预方法
1.6 标本采集
1.7 观察指标及方法
1.7.1 大鼠一般情况及疾病活动指数评分
1.7.2 结肠组织形态学及病理形态观察
1.7.3 免疫组化检测
1.7.4 透射电镜观察
1.7.5 Western Blot检测
1.7.6 免疫荧光检测
1.8 统计分析
2 结果
2.1 大鼠一般情况比较
2.2 各组大鼠结肠形态变化比较
2.3 各组大鼠结肠组织病理变化
2.4 大鼠结肠组织Occludin、Claudin-1蛋白表达水平情况
2.5 结肠组织透射电镜情况
