摘要:目的 探讨黄芩素对人前列腺癌细胞抑制作用机制。方法 培养人前列腺癌细胞(DU145),使用不同浓度的黄芩素、LY294002干预前列腺癌细胞;采用CCK8(cell counting kit-8)法检测细胞增殖速率,通过Western blot检测相关蛋白来研究黄芩素、LY294002对前列腺癌细胞的影响。结果 不同浓度黄芩素分别干预24 h、48 h、72 h后,CCK8检测结果表明,用40 μmol/L黄芩素干预72 h后可显著抑制细胞增值速率。通过Western blot检测BCL-2相关X蛋白(BCL-2-associated X protein,Bax)、B细胞淋巴瘤-2蛋白(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、磷酸化蛋白激酶(rat phosphorylated AKT protein,B p-AKT)、磷酸化雷帕霉素机制靶蛋白(mammalian target of rapamycin,p-mTOR)表达,结果表明,使用磷酸肌醇3-激酶 (phosphoInositide-3 Kinase,PI3K)抑制剂LY294002干预后,p-AKT、p-mTOR、Bcl-2表达显著降低,Bax显著升高,当黄芩素和LY294002联合干预后,p-AKT、p-mTOR、Bcl-2表达水平降低更显著;Bax升高更显著。结论 黄芩素可破坏DU145细胞正常生长,抑制DU145细胞增殖,具有时间以及浓度依赖性,其机制与PI3K/Akt/mTOR信号通路的关键因子PI3K、Akt、mTOR相关。
文章目录
1 材料与方法
1.1 细胞系
1.2 材料与仪器
1.3 CCK-8试验药物配制及试验分组
1.4 细胞干预药物配制及试验分组
1.4.1 药物配制
1.4.2 试验分组
1.4.3 试验步骤
1.5 统计学方法
2 结果
2.1 黄芩素对DU145细胞的时间及浓度依赖性影响
2.2 蛋白免疫印记(Western blot)试验结果
3 讨论