摘要：【目的】分离鉴定1株来自患病珍珠龙胆石斑鱼的病原菌，并对该菌的类型、生理生化特性、药敏特性和致病性开展研究，为其病害防控提供理论基础。【方法】在湛江市某养殖场发现患病石斑鱼，无菌条件下从脾脏中分离得到1株优势菌（OR539201），对该菌株开展形态学观察、16S rRNA基因序列分析及生理生化特性鉴定，进一步开展药敏试验、回归感染试验，并检测其毒力基因。【结果】根据分离菌株的形态学观察、16S rRNA序列分析和生理生化鉴定，确定菌株OR539201为美人鱼发光杆菌美人鱼亚种（Photobacterium damselae subsp. damselae）。该菌株在LB平板上呈现圆形菌落，形态圆润、饱满，光滑均匀。在16S rRNA系统发育树中，与美人鱼发光杆菌聚为一支，亲缘关系最近，同为弧菌属。生化鉴定结果显示，氧化酶活性、尿素、赖氨酸等反应呈阳性，水杨苷、甘露醇等反应呈现阴性。药敏试验结果表明，该菌株对多粘菌素、丁胺卡那、头孢曲松等6种抗生素中等敏感，对氧氟沙星、环丙沙星、头孢氨苄等13种抗生素敏感。回归感染试验结果表明，该菌对石斑鱼具有致病性，人工感染后出现体表溃疡、红色增生结节、肝脏肿大、肠道糜烂、脑部红肿等与自然感染相同的症状。菌量测定结果显示，试验组石斑鱼脾脏及肝脏菌量明显高于对照组。毒力基因检测结果显示，该致病菌具有磷脂酶活性相关基因（plpV）。【结论】成功从患病石斑鱼中分离得到1株潜在致病菌，鉴定为美人鱼发光杆菌，该菌株具有明显致病性，可诱发明显病变、引起鱼类死亡。
文章目录
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.2 试验方法
1.2.1 病原菌分离
1.2.2 病原菌形态学鉴定
1.2.3 细菌16SrRNA序列及其系统发育分析
1.2.4 生化鉴定
1.2.5 药敏试验
1.2.6 病原菌回归感染试验
1.2.7 涂板法检测脾脏及肝脏菌量
1.2.8 病原菌毒力基因的检测
2 结果与分析
2.1 病原菌的分离及形态学观察
2.2 病原菌16S rRNA序列分析及系统发育树的构建
2.3 病原菌生理生化鉴定
2.4 药敏试验
2.5 回归感染试验及载菌量比较
2.6 病原菌毒力基因检测结果
3 讨论
