为明确引发湖南地区金丝皇菊(Chrysanthemum morifolium‘Jinsi Huangju’)典型花叶病害的病原物种类,研究以湖南洪慈菊花种植基地内出现花叶症状的金丝皇菊植株病叶为试验样本,通过RT-PCR扩增测序、负染色电镜观察法和酶联免疫吸附法,从核酸序列、形态结构及蛋白质特异性3个维度明确导致金丝皇菊花叶病害的病原物种类。结果表明:通过RTPCR从病叶样本中扩增到2条目的条带,分别与菊花褪绿斑驳类病毒(CChMVd)和菊花B病毒(CVB)的目的基因片段长度相近;经酶联免疫吸附法检测确定病叶样本中含有CVB的特异性蛋白;病叶样本制备的悬浮液经负染色电镜观察发现了两种形态的病原组分,分别与CChMVd和CVB形态结构相似;系统发育树显示,湖南病叶样本分离物(类病毒)与西班牙发现的4个参考分离物(CChMVd,FJ647546.1等)聚在同一分支,序列相似度为87%;湖南病叶样本分离物(病毒)与南京分离物(CVB,JQ904595.1)同属一个分支,高度同源(100%)。综上,引发当地金丝皇菊叶片呈现典型花叶症状的病原物为CChMVd和CVB,这两种病原物的复合侵染导致了花叶病害的发生。