摘要：本研究通过整合生物信息学分析与实验验证，系统探讨中胚层发育关键基因在黑色素瘤发生发展中的分子机制。基于GSVA算法对406例皮肤黑色素瘤（skin cutaneous melanoma，SKCM）患者的7 752项生物功能进行富集分析，发现中胚层发育在黑色素瘤的发生发展中具有重要作用。通过LASSO-COX算法筛选出SMAD4、NODAL、BMPR1A和ZFP36L1共4个核心调控基因，并构建预后相关风险评分体系。基因本体论（Gene Ontology，GO）和京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）通路分析显示，这些基因主要富集于mRNA代谢过程和TGF-β信号通路相关通路。通过定量聚合酶链式反应、蛋白质印迹及免疫组化证实：SMAD4和BMPR1A在肿瘤组织中的表达下调与不良预后显著相关（P<0.05）；NODAL通过调控上皮-间质转化（EMT）过程促进肿瘤侵袭转移；ZFP36L1高表达组则表现出更好的化疗敏感性。进一步分析发现，核心基因表达水平与肿瘤免疫浸润特征及免疫检查点分子存在显著相关性。本研究通过多组学分析结合实验验证，揭示了中胚层发育相关基因在黑色素瘤进展中的关键作用，阐明了SMAD4/NODAL/BMPR1A/ZFP36L1通过免疫微环境调控和EMT过程影响肿瘤生物学行为的分子机制，为黑色素瘤的分子分型和靶向治疗提供了新的理论依据。
文章目录
1材料与方法
1.1 数据搜集和准备
1.2 生物功能富集评分
1.3 皮肤黑色素瘤预后模型的构建
1.4 免疫相关分析
1.5 Western 印迹检测蛋白质表达
1.6 RNA提取，逆转录RNA，定量实时聚合酶链反应
1.7 苏木精—伊红（H&E）染色和免疫组织化学
1.8 统计学分析
2 结果
2.1 中胚层发育相关基因是黑色素瘤的独立预后因素
2.2 Riskscore与mRNA代谢过程的调节和TGF-β信号通路密切相关
2.3 Riskscore联合临床病理因素可稳定预测黑色素瘤的预后
2.4 Co-DEGs与免疫细胞和免疫检查点之间存在显著相关性
2.5 通过qPCR、Western 印迹和IHC验证Co-DEGs在黑色素瘤中的表达
3 讨论
