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摘要：尿酸氧化酶（urate oxidase，Uox）是尿酸代谢的关键酶，已经用于人高尿酸血症（hyperuricemia，HUA）的治疗。然而，异源性尿酸氧化酶进入血液会引发免疫排斥反应产生抗体，影响疗效。本研究采用食品级益生菌乳酸乳球菌（Lactococcus lactis）NZ9000为底盘细胞，构建了表达黄曲霉源尿酸氧化酶的工程菌（NZ9000-aUox）和“恢复”活性的人源尿酸氧化酶的工程菌（NZ9000-hUox）。结果表明，表达外源尿酸氧化酶的工程菌可在体外降低尿酸，并具有时间依赖性。进一步，利用酵母膏成功诱导小鼠血尿酸升高，在第7 天和第14 天灌胃给予酵母膏的小鼠血尿酸均值分别升高85.4%和106.2%；同时工程菌NZ9000-aUox给药组小鼠血尿酸仅升高39.5%和48.3%，NZ9000-hUox给药组小鼠血尿酸升高57.0%和82.9%，证明工程菌能明显抑制血尿酸的升高。将效果更加显著的工程菌NZ9000-aUox与高尿酸血症一线治疗药物别嘌醇进行安全性比较，结果显示工程菌的肝脏安全性与别嘌醇相当，肾脏安全性优于别嘌醇，不仅能够缓解血尿酸升高导致的肾损伤，还能够避免别嘌醇治疗过程中可能引发的肾损伤加重风险。本研究为高尿酸血症的长期治疗和调控提供了一种有效并且更加安全的治疗方法。
文章目录
1 材料与方法
1.1 质粒、菌株和试剂
1.2 pNZ8148-aUox和pNZ8148-hUox质粒的构建与表达
1.3 工程菌的比活性测定与制备
1.4 工程菌干预小鼠高尿酸血症
1.5 肝肾功能测定
1.6 统计学分析
2 结果与分析
2.1 NZ9000工程菌外源尿酸氧化酶的诱导表达检测
2.2 工程菌体外降尿酸活性评价
2.3 工程菌体内降尿酸效果评价
2.4 工程菌与别嘌醇对小鼠肝肾功能的影响
3 讨论与结论
