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摘要：目的 探究三结构域蛋白45(TRIM45)通过靶向胰岛素样生长因子1受体（IGF-1R）抑制人乳癌MCF-7细胞增殖和迁移的作用机制。方法 将人乳癌MCF-7细胞分为TRIM45过表达组、空载对照组及阴性对照组。通过细胞增殖实验及划痕实验进行细胞增殖及迁移能力检测，采用蛋白质免疫印迹（WB）法检测自噬相关蛋白p62、微管相关蛋白Ⅰ轻链3B(LC3B)、自噬相关蛋白8(ATG8)的表达，通过免疫沉淀实验分析TRIM45与IGF-1R的结合，采用WB法检测促增殖蛋白IGF-1R和簇集蛋白（CLU）的表达。结果 与空载对照组相比较，TRIM45过表达组不同时间的细胞增殖率及迁移率均显著降低（F=19.87～177.91,P<0.05）。与空载对照组相比较，TRIM45过表达组细胞自噬相关蛋白p62的表达显著降低，LC3B和ATG8的表达显著增加（F=22.97～113.50,P<0.05）。TRIM45可以与IGF-1R结合，并且TRIM45过表达组细胞IGF-1R及CLU蛋白表达较空载对照组显著降低（F=51.06、30.45,P<0.05）。结论 TRIM45可以与IGF-1R结合，抑制IGF-1R及CLU的表达，诱导乳癌细胞自噬，抑制乳癌细胞的增殖和迁移能力。
文章目录
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.2 实验方法
1.2.1 细胞培养
1.2.2 细胞转染
1.2.3 蛋白质免疫印迹（WB）法检测蛋白表达
1.2.4 细胞增殖实验
1.2.5 划痕实验
1.2.6 免疫沉淀（IP）实验
1.3 统计学分析
2 结果
2.1 TRIM45对MCF-7细胞增殖活力的影响
2.2 TRIM45过表达对MCF-7人乳癌细胞迁移能力的影响
2.3 TRIM45对MCF-7细胞自噬的影响
2.4 TRIM45与IGF-1R的相互作用
2.5 TRIM45对乳癌细胞IGF-1R和CLU蛋白表达的影响
3 讨论
