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摘要：MHCB2单倍型鸡对禽白血病病毒感染有较强抗性，这种抗病性可能与被MHC分子递呈的表位刺激活化的T细胞产生的免疫应答有关。本研究拟阐明MHC Ⅰ类分子BF2*0201递呈ALV-J表位结构和递呈机制。利用凝胶过滤层析筛选出能与MHCⅠ 稳定结合的肽。利用晶体初筛试剂盒在体外培育肽和MHCⅠ的二元复合物晶体，并利用COOT、CCP4和PYMOL等软件对该晶体结构进行解析和分析。在这项研究中，我们发现二个与BF2*0201稳定结合的ALV-JCTL表位FVDFANRLI和SALQAFREV。我们得到一个优质晶体BF2*0201-SALQAFREV(SV9)，其生长条件为1.0mol·L-1 Succinicacid(pH7.0)，0.1mol·L-1HEPES(pH7.0)，1%Polyethyleneglycolmonomethylether2，000。我们解析高分辨率(1.72?)的BF2*0201-SV9复合物结构后发现BF2*0201抗原结合槽整体呈现弱负电性。保守的残基多位于抗原结合槽的两端，特异性氨基酸赋予BF2*0201中等大小的抗原结合槽。B、C和F口袋起着较重要的锚定作用，口袋残基和水分子与抗原多肽形成氢键作用，将其固定在抗原结合槽中。SV9表位构象中突出的P4-Gln和P7-Arg残基的构象特征表明该位点有被特异性TCR潜在识别的特性。BF2*0201-SV9复合物晶体结构特征有助于阐明B2单倍型MHCⅠ类分子BF2*0201递呈ALV-J表位的机制，有助于解释B2单倍型鸡对ALV存在抗性的原因，为抗病育种工作奠定理论基础。
文章目录
1 材料与方法
1.1 ALV-J病毒多肽的合成
1.2 B2 单倍型MHC I分子蛋白的表达
1.3 pBF2*0201二元复合物的筛选及纯化
1.4 pBF2*0201晶体制备和数据收集
1.5 pBF2*0201晶体结构解析和重修
1.6 pBF2*0201晶体结构分析和绘图
2 结 果
2.1 稳定pBF2*0201二元复合物的筛选和晶体制备
2.2 pBF2*0201的总体结构和抗原结合槽特征
2.3 pBF2*0201复合体的多肽结合槽的分析
2.4 P4 和P7是TCR潜在的结合位点
3 讨 论
4 结 论
