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获能物质及微流控精子分离器对牛性控精子的影响

2024-05-20 13:05520下载
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  摘要:实验旨在研究获能物质及微流控精子分离器(MFSS)对牛性控精子的影响。在BO液中添加获能物质(空白对照组、10 μg/mL肝素组、5 mmol/L咖啡因组、10 μg/mL肝素+5 mmol/L咖啡因组)对牛性控精子进行获能,比较各组性控精子活率、活力及运动参数;利用MFSS(MFSS分为入口A储精室、B培养液室和出口C运动不良精子分离室、D运动良好精子分离室4个小室)分离获能效果较好的牛性控精液,测定A、C、D各小室精子的活率、活力、密度以及运动参数,分离后的精子经JC-1染色,流式细胞仪检测各小室精子线粒体相对活性和线粒体活性均衡精子。结果表明:空白对照组、10 μg/mL肝素组、5 mmol/L咖啡因组、10 μg/mL肝素+5 mmol/L咖啡因组精子获能后的精子活力、活率、运动性能均无显著差异。5 mmol/L咖啡因组经MFSS分离5 min后D室中精子活力、活率和线粒体相对活性高于A室和C室(P<0.05),精子密度低于A室(P<0.05),其他各组间差异均不显著。由此可见,获能物质咖啡因能够诱导牛精子体外获能,但作用效果不显著;MFSS能分离出高活力、高运动性能的精子,且精子的活力、运动性能与精子线粒体活性有关。

  文章目录

  1 材料与方法

  1.1 主要试剂与溶液配置

  1.2 实验设计

  1.3 精液处理及精子质量测定

  1.4 MFSS分离精子

  1.4.1 MFSS原理及使用方法

  1.4.2 MFSS准备

  1.4.3 MFSS分离精子

  1.4.4 流式细胞仪检测分析

  1.5统计分析

  2 结 果

  2.1肝素、咖啡因对牛性控精子活率、活力的影响

  2.2肝素、咖啡因对牛性控精子运动参数的影响

  2.3 微流控精子分离器分离牛性控精子质量的影响

  2.4微流控精子分离器分离牛性控精子运动参数的影响

  2.5 微流控精子分离器分离牛性控精子线粒体活性的影响

  3 讨 论

  3.1肝素、咖啡因对牛性控精子活率、活力及运动参数的影响

  3.2 MFSS分离牛性控精子

  4 结 论



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