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摘要：目的：观察电针是否通过激活腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）来维护线粒体稳态，从而减轻糖尿病胃轻瘫（DGP）大鼠胃窦组织NOD样受体蛋白3（NLRP3）激活介导的炎性反应并改善其胃动力，探讨电针防治DGP的深层效应机制。方法：SD大鼠随机分为空白组、模型组和电针组，每组10只。采用腹腔注射2%链脲佐菌素溶液配合高糖高脂饲料不规则喂养法制备DGP模型。电针组以疏密波20 Hz/100 Hz电针“足三里”“梁门”“三阴交”15 min，每日1次，每5 d为1个疗程，每疗程结束休息2 d，共3个疗程。观察各组大鼠血糖、一般症状、胃排空率和小肠推进率，苏木精-伊红（HE）染色观察大鼠胃窦组织病理形态，Western blot法检测胃窦AMPK、磷酸化AMPK（p-AMPK）、NLRP3蛋白表达，透射电镜观察胃窦细胞线粒体超微结构，二氢乙锭（DHE）荧光探针检测活性氧（ROS）水平，JC-1法检测线粒体膜电位变化，试剂盒测定三磷酸腺苷（ATP）含量。结果：造模后，与空白组相比，造模组大鼠血糖水平和一般症状积分显著升高（P<0.01），胃排空率与小肠推进率显著下降（P<0.01）。干预后，与空白组相比，模型组血糖和症状评分仍升高、胃排空率与小肠推进率显著下降（P<0.01），胃窦组织存在明显炎性病理改变，AMPK和p-AMPK表达量降低、NLRP3表达量升高（P<0.01），可见线粒体形态结构受损，细胞内ROS含量增多（P<0.01），线粒体膜电位水平和ATP含量降低（P<0.01）；与模型组相比，电针组大鼠血糖水平和症状积分降低（P<0.05），胃排空率和小肠推进率提高（P<0.01），胃窦组织的病理损伤减轻，AMPK和p-AMPK蛋白表达升高而NLRP3相对表达量下调（P<0.01），线粒体超微结构改善，ROS含量较前减少（P<0.01），线粒体膜电位水平和ATP含量亦升高（P<0.01）。结论：电针能够通过激活AMPK改善受损的线粒体结构与功能，促进线粒体稳态的恢复，从而抑制NLRP3炎性小体及其介导的胃窦组织炎性反应来改善DGP。
文章目录
1 材料与方法
1.1 实验动物及分组
1.2 主要试剂及仪器
1.3 模型制备
1.4 干预方法
1.5 观察指标及检测方法
1.6 统计学分析
2 结果
2.1 各组大鼠随机血糖检测结果比较
2.2 各组大鼠一般症状及评分结果比较
2.3 各组大鼠胃排空率和小肠推进率比较
2.4 各组大鼠胃窦组织病理形态比较
2.5 各组大鼠胃窦组织AMPK、p-AMPK、NLRP3蛋白相对表达量比较
2.6 各组大鼠胃窦部线粒体超微结构比较
2.7 各组大鼠胃窦组织细胞内ROS表达比较
2.8 各组大鼠胃窦组织线粒体膜电位水平比较
2.9 各组大鼠胃窦组织ATP含量比较
3 讨论
