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基于PI3K/AKT信号通路探讨电针足少阳经穴改善绝经后骨质疏松大鼠炎性反应的作用机制

2025-06-12 15:01100下载
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  目的:探讨电针足少阳经穴调控磷脂酰肌醇3-激酶(P13K)/丝氨酸-苏氨酸激酶(AKT)信号通路对绝经后骨质疏松大鼠炎性反应的影响。方法:40只SD大鼠随机选择10只作为假手术组;其余大鼠切除双侧卵巢3个月后构建绝经后骨质疏松模型,随机分为模型组、电针组、电针+抑制剂组,每组10只。电针组电针双侧“环跳”“阳陵泉”(疏密波,频率2 Hz/15 Hz,强度0.2~0.6 mA)并针刺“悬钟”,每次10 min,每周5次,共治疗8周,穴位左右交替。电针+抑制剂组在电针组治疗基础上腹腔注射PI3K抑制剂LY294002(10 mg/kg),每周2次,共治疗8周。Micro-CT检测大鼠股骨骨组织微结构及计量学指标,包括骨密度(BMD)、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁分离度(Tb.Sp)。HE染色观察股骨病理形态,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察破骨细胞数量。免疫组织化学染色检测骨组织成骨标志物Runt相关转录因子2(Runx2)、骨钙素(OCN)、Ⅰ型胶原蛋白(Collagen I)的表达。ELISA法及实时荧光定量PCR法分别检测血清及骨组织中白细胞介素-1β(1L-1β)、白细胞介素-6(1L-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量及mRNA的表达。Western blot法检测股骨组织PI3K/AKT通路蛋白表达。结果:模型组大鼠骨小梁明显变细,排列稀疏、紊乱,骨髓腔扩大,破骨细胞数量明显增多;电针组的骨小梁结构形态改善,破骨细胞数量减少。与假手术组相比,模型组大鼠BMD、BV/TV、Tb.N,骨组织Runx2、OCN、Collagen I阳性表达,p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT蛋白表达比值显著降低(P<0.01),Tb.Sp、血清及骨组织中的IL-6、IL-1β、TNF-α含量及mRNA表达显著升高(P<0.01)。与模型组相比,电针组大鼠BMD、BV/TV、Tb.N,骨组织Runx2、OCN、Collagen I阳性表达,p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT蛋白表达比值显著升高(P<0.01,P<0.05),Tb.Sp、血清及骨组织中的IL-6、IL-1β、TNF-α含量及mRNA表达显著降低(P<0.01)。与电针组相比,电针+抑制剂组大鼠上述指标除Tb.Sp外均逆转(P<0.01,P<0.05)。结论:电针足少阳经穴可减轻绝经后骨质疏松大鼠的炎性反应和骨质流失,其作用可能与PI3K/AKT通路的激活有关。



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