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[目的]开发针对新型冠状病毒(Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2,SARS-Co V-2)变异株的广谱性重组蛋白疫苗,评估其免疫原性,为冠状病毒疫苗的研发奠定基础。[方法]构建含XBB. 1.5 S蛋白三聚体编码序列的p EE12.4-PF-XBB. 1.5质粒,在人胚肾上皮细胞(293F)、中国仓鼠卵巢细胞K1株(CHO-K1)两种细胞系中高效表达XBB. 1.5 S蛋白三聚体,并用自制的TD Ab进行S蛋白的纯化。以SD大鼠为动物模型进行免疫接种实验,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)、固相酶联免疫斑点技术(ELISpot)及病毒中和试验进行免疫原性评估。[结果]流式细胞术监测GFP蛋白的表达率维持在60%以上。ELISA结果显示,免疫组第三针接种后的抗体几何平均滴度(GMT)可达1.08×108。病毒中和试验表明,SD大鼠血清对XBB. 1.5假病毒具有较强的中和能力,中和抗体效价(NT50)值为11 469,且对Delta假病毒也显示出了广谱保护作用。ELISpot显示,免疫组SD大鼠脾脏细胞介导的IFN-γ免疫反应强烈,与空白组、佐剂组相比差异极显著。[结论] XBB. 1.5重组蛋白疫苗的特异性抗体水平是灭活疫苗的6.4倍,能诱导强烈的免疫原性和广谱保护效果。
