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目的 探讨组蛋白乙酰化转移酶（p300）介导过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)通过脂质过氧化反应影响糖尿病视网膜病变的分子机制。方法 采用链脲佐菌素腹腔注射方法对65只SD大鼠构建糖尿病模型，余10只SD大鼠同步腹腔注射等量无菌生理盐水记为正常组。将建模成功大鼠随机分为6组，即p300上调组、p300下调组、PPAR-γ上调组、PPAR-γ下调组、空载对照组和模型组。除正常组和模型组（同步经玻璃体注射等量无菌生理盐水）外，各组分别经玻璃体注射pcDNA-p300、si-p300、pcDNA-PPAR-γ、si-PPAR-γ、pcDNA腺病毒溶液。每组各取5只大鼠，Evans blue法检测左眼血-视网膜屏障损伤程度；全自动生化分析仪检测各组脂质[甘油三酯（TG）、胆固醇（TC）、低密度脂蛋白-胆固醇（LDLC）、高密度脂蛋白-胆固醇（HDL-C）]、过氧化反应指标[超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量和活性氧（ROS）水平]；上述各组5只大鼠取右眼视网膜组织行苏木素-伊红（HE）染色观察病理改变；每组剩余大鼠断头法处死后，实时定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测左眼视网膜组织p300、PPAR-γ、蛋白激酶Cβ(PKCβ)、衔接蛋白p66Shc(P66Shc)信使核糖核酸（mRNA）表达，免疫标记法（Western blot）检测右眼视网膜组织上述蛋白表达和P66Shc磷酸化水平；染色质免疫沉淀技术（ChIP）验证p300靶向PPAR-γ并观察定位情况。结果 与正常组比较，其余各组Evans blue浓度、白蛋白渗透，血清TG、TC、LDL-C、MDA含量和ROS水平均升高而HDL-C、SOD活性，p300、PPAR-γ、PKCβ、P66Shc表达和P66Shc磷酸化水平均下降（P <0.05）。与模型组比较，p300下调组p300表达下降（P <0.05）、p300下调组和PPAR-γ下调组Evans blue浓度、白蛋白渗透，血清TG、TC、LDL-C、MDA含量和ROS水平均升高而HDL-C、SOD活性，PPAR-γ、PKCβ、P66Shc表达和P66Shc磷酸化水平均下降（P <0.05）,p300上调组p300表达升高（P <0.05）、p300上调组和PPAR-γ上调组Evans blue浓度、白蛋白渗透，血清TG、TC、LDL-C、MDA含量和ROS水平均下降而HDL-C、SOD活性，PPAR-γ、PKCβ、P66Shc表达和P66Shc磷酸化水平均升高（P <0.05）。p300下调组与PPAR-γ下调组、p300上调组与PPAR-γ上调组、空载对照组与模型组血-视网膜屏障损伤，脂质和过氧化反应指标，PPAR-γ、PKCβ、P66Shc表达和P66Shc磷酸化差异均无统计学意义（P> 0.05）。正常组大鼠视网膜组织无病理改变，模型组和空载对照组可见明显病理改变，p300下调组和PPAR-γ下调组可见严重病理改变，而p300上调组和PPAR-γ上调组病理改变轻微；ChIP证实p300靶向PPAR-γ，且二者均定位于细胞质。结论 上调p300可正向介导PPAR-γ控制脂质过氧化反应减轻糖尿病视网膜病变，而下调p300可通过抑制PPAR-γ激活脂质过氧化反应促进糖尿病视网膜病变。
