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摘要:探讨川芎多糖对小鼠免疫调节及肠道菌群的影响。通过实验制备川芎多糖,并分析其化学组成。选用雄性昆明小鼠,以腹腔注射环磷酰胺诱导免疫抑制模型,给予川芎多糖干预12 d后,测定血清溶血素等免疫功能相关指标,并采用16S rRNA基因高通量测序技术测定肠道菌群的物种组成、丰度及多样性。同时结合生物信息学分析方法,深入探究肠道菌群群落结构的代谢通路、相关性分析等。川芎多糖分子量处于45.0~220.0 kDa区间,可能具有免疫活性。进一步实验表明,与免疫抑制模型组小鼠相比,川芎多糖给药组小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能增强、血清溶血素含量升高、脾脏指数和胸腺指数均显著改善,呈现出有利于免疫平衡的调节趋势。此外川芎多糖干预组小鼠肠道菌群结构发生显著改变,Lachnospiraceae和Akkermansia等有益菌的相对丰度显著恢复,从多样性指数来看,肠道菌群的丰富度得到有效提升,相关性热图结果提示,这些肠道菌群的变化与小鼠免疫功能改善密切相关。综上所述,川芎多糖免疫调节作用可能与调节肠道菌群结构,进而改善肠道微生态环境有关。
文章目录
1 材料与方法
1.1 药材与动物
1.2 试剂与仪器
1.3 CRP的制备
1.4 CRP的化学组成
1.5 动物分组、模型复制及给药
1.6 血清溶血素测定
1.7 单核-巨噬细胞吞噬功能测定
1.8 体重和免疫器官指数测定
1.9 细胞因子测定
1.10 脾脏和胸腺组织形态观察
1.11 16S rRNA扩增子测序检测粪便肠道菌群
1.12 统计学处理方法
2 结果
2.1 CRP化学组成
2.2 CRP对血清溶血素的影响
2.3 CRP对小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能的影响
2.4 体重和免疫脏器指数的变化
2.5 CRP对小鼠血清细胞因子的影响
2.6 CRP对小鼠胸腺和脾脏组织形态学的影响
2.7 肠道菌群的组成和多样性
2.7.1 肠道菌群组成分析
2.7.2 肠道微生物群的Alpha和Beta多样性分析
2.7.3 显著性差异分析