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目的:探讨鹿茸多肽对成肌细胞分化过程中线粒体能量代谢效率的调控作用,并阐明其相关机制。方法:采用增殖培养液维持C2C12成肌细胞增殖,加入分化培养液诱导细胞分化,分化时间为1、3和5d,分化的成肌细胞分为对照组和鹿茸多肽组,鹿茸多肽组加入80 mg·L-1鹿茸多肽,对照组给予同等体积磷酸盐缓冲液（PBS）。细胞计数试剂盒8 （CCK-8）法检测0、5、10、20、40、60、80、120、160和200 mg·L-1鹿茸多肽处理后各组未分化细胞增殖率,免疫荧光法检测各组细胞融合指数,Western blotting法检测各组细胞中肌球蛋白、肌细胞生成素、醌氧化还原酶亚基B8（NDUFB8）、线粒体编码细胞色素C氧化酶1 （MT-CO1）和琥珀酸脱氢酶复合体黄蛋白亚基A（SDHA）蛋白表达水平,2,7-二氯荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）荧光探针法检测各组细胞中活性氧（ROS）水平,线粒体膜电位检测试剂盒（JC-1）检测各组细胞线粒体膜电位,试剂盒检测各组细胞中三磷酸腺苷（ATP）水平、葡萄糖摄取量和乳酸水平。结果:与0mg·L-1鹿茸多肽处理组比较,60、80、120、160和200 mg·L-1鹿茸多肽处理组未分化C2C12成肌细胞增殖率明显升高（P<0.05）。免疫荧光法检测,与分化同期对照组比较,分化3和5 d鹿茸多肽处理组C2C12成肌细胞融合指数均明显降低（P<0.05）,多核肌管细胞数量明显减少。Western blotting法检测,与分化同期对照组比较,分化1、3和5d鹿茸多肽组细胞中肌球蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）;分化3和5d鹿茸多肽组细胞肌细胞生成素蛋白表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01）。与分化同期对照组比较,分化5d鹿茸多肽组细胞NDUFB8和MT-CO1蛋白表达水平均明显降低（P<0.05或P<0.01）;分化1、3和5d鹿茸多肽组细胞SDHA蛋白表达水平均明显降低（P<0.05或P<0.01）。DCFH-DA荧光探针法检测,与分化同期对照组比较,分化5d鹿茸多肽组细胞ROS水平明显降低（P<0.01）。JC-1试剂盒检测,与分化同期对照组比较,分化3和5d鹿茸多肽组细胞线粒体膜电位均明显升高（P<0.05）。与分化同期对照组比较,分化1d鹿茸多肽组细胞葡萄糖摄取量明显降低（P<0.01）,分化5d鹿茸多肽组细胞葡萄糖摄取量明显升高（P<0.05）;分化1、3和5d鹿茸多肽组细胞乳酸水平差异均无统计学意义（P>0.05）;分化1和3d鹿茸多肽组细胞ATP水平明显升高（P<0.05）。结论:鹿茸多肽对C2C12成肌细胞分化具有抑制作用,其机制可能与鹿茸多肽降低线粒体氧化磷酸化复合体亚基表达,提高线粒体氧化磷酸化效率有关。
