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摘要：为筛选双峰驼卵巢发育相关miRNA，选取6峰年龄和体重相近的健康未孕双峰驼为研究对象，按试验要求分为2组（繁殖季节组和非繁殖季节组），采用转录组测序对双峰驼卵巢组织中的miRNA进行分析，鉴定差异表达miRNA，对其差异表达基因进行GO功能及KEGG通路富集分析，筛选与卵巢发育相关的miRNA，并随机挑选4个差异表达miRNA进行验证。结果表明：有741个miRNA在繁殖与非繁殖季节卵巢中呈现表达，有58个miRNA仅在繁殖季节中特异性表达，有60个miRNA只在非繁殖季节特异性表达；通过筛选鉴定了47个差异表达的miRNA，与非繁殖季节比较，繁殖季节卵巢中有26个miRNA显著上调，21个miRNA下调；KEGG富集分结果显示，miRNA靶基因主要富集于MAPK、PI3K-Akt、AMPK、Hippo、Rap1、p53、Wnt等卵巢发育相关信号通路上；选择参与以上信号通路中的miR-10b、miR-361、miR-196a和miR-345-5p等4个差异表达miRNA进行RT-qPCR 验证，发现在繁殖季节母驼卵巢中miR-10b、miR-361显著上调（P<0.05），miR-196a极显著上调（P<0.01），miR-345-5p极显著下调（P<0.01），此结果与miRNA测序结果相一致。说明miRNA在双峰驼卵巢发育过程中发挥着重要作用。
文章目录
1 材料与方法
1.1 试验样品
1.2 主要试剂与仪器
1.3 试验方法
1.3.1 卵巢总RNA的提取及质量检测
1.3.2 miRNA 文库构建和上机测序
1.3.3 miRNA鉴定和预测分析
1.3.4 miRNA靶基因的GO功能分析和KEGG信号通路分析
1.3.5 验证miRNA测序结果
1.4数据的统计分析
2 结果与分析
2.1 数据质控
2.2 差异表达 miRNA鉴定
2.3 差异表达靶基因的GO 分析
2.4 差异表达靶基因的KEGG分析
2.5 差异表达 miRNA 验证
3 讨论
4 结论
