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摘要：己二醛可用于聚酰胺（如尼龙-6，6）、聚酯和聚氨酯等的制备，然而，其化学合成面临着高成本、不易循环、对环境不友好等一系列挑战。为了开发绿色的己二醛合成工艺，该研究利用己二酸为原料构建己二醛生物合成途径，通过基因敲除和发酵优化提高生产效率，最后通过体外催化降低产物毒性抑制以提高己二醛积累量。结果表明，敲除部分内源性醛还原酶基因以及进行发酵优化可显著提高产量，己二醛的发酵产量较初始菌株提高了20.3倍，达到190 mg/L。在此基础上进行体外催化，其产量较初始菌株提高了32.2倍，达到295.8 mg/L，是目前己二醛生物合成领域的最高报道。该研究可为脂肪族二醛的生物合成提供支持和借鉴。
文章目录
1 材料与方法
1.1 材料和试剂
1.1.1 菌株和质粒
1.2 实验方法
1.2.1 菌株培养方法
1.2.2 基因敲除
1.2.3 发酵优化
1.2.4 蛋白表达和纯化
1.2.5 体外酶催化
1.2.6 无细胞催化
1.2.7 样品处理方法
1.2.8 分析方法
2 结果与分析
2.1己二醛人工合成途径的构建和验证
2.2 基因敲除强化己二醛合成
2.3 CAR同工酶挖掘提高己二醛合成效率
2.4 底物对己二醛合成的影响研究
2.5 IPTG对己二醛合成的影响研究
2.6 己二醛高产菌株的稳定性研究
2.7 无细胞体系中己二醛的催化合成
