巨噬细胞乳酸化修饰促进肝细胞增殖的机制研究

2025-06-13 10 1.09M 0

  目的 探讨巨噬细胞乳酸化修饰对肝细胞增殖的影响,并揭示其潜在的作用机制。方法小鼠巨噬细胞RAW264.7随机分为四组:对照组、LPS(脂多糖)组、LPS+乳酸钠(Nala)组、LPS+草氨酸钠(OXA)组,使用乳酸测定试剂盒测定细胞中乳酸含量,免疫荧光(IF)检测细胞乳酸化修饰水平,q RT-PCR检测细胞中白细胞介素-10(IL-10)、精氨酸酶1(ARG1)的m RNA水平,ELISA检测细胞上清中IL-10、ARG1的蛋白浓度水平。收集上述四组RAW264.7细胞的培养基作条件培养基,处理肝细胞AML-12,CCK-8检测细胞活力,Western blot检测增殖细胞核抗原蛋白(PCNA)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)和细胞周期依赖性激酶4蛋白(CDK4)。结果 与对照组RAW264.7细胞相比,LPS组RAW264.7细胞的乳酸含量、乳酸化修饰水平、IL-10和ARG1的m RNA表达以及RAW264.7细胞上清液中IL-10、ARG1的蛋白浓度均显著升高;外源性添加Nala进一步增强了这些指标,而乳酸脱氢酶(LDHA)抑制剂OXA则能够抑制其上升趋势。使用条件培养基处理AML-12细胞后,LPS刺激的RAW264.7细胞能够显著提高AML-12细胞的活力,并上调PCNA、Cyclin D1和CDK4的蛋白表达水平。外源性添加Nala进一步增强了这些效应,而OXA则能够抑制这种上升趋势。结论 巨噬细胞通过乳酸化修饰上调IL-10和ARG1的表达,进而促进肝细胞的增殖。



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