背景：组织工程支架的物理特性可直接影响种子细胞活性及修复效果，其中细胞外基质硬度是影响种子细胞增殖活性的关键因素，初级纤毛和YAP蛋白作为经典的力学感受器及下游转导因子，可能直接介导了这一机制。目的：探讨细胞外基质硬度对骨髓基质干细胞增殖活性的调控作用及相关机制。方法：骨髓基质干细胞传代后接种于不同硬度(软、中度、硬)的聚二甲基硅氧烷基底膜进行培养，CCK-8测定细胞增殖活性，qRT-PCR检测增殖基因c-myc和CCND1的转录活性，Western blot检测Wnt/β-catenin通路激活情况，通过乙酰化α-tubulin及YAP免疫荧光染色评估初级纤毛及YAP蛋白表达。骨髓基质干细胞传代后接种于不同硬度(软、硬)的聚二甲基硅氧烷基底膜进行培养，然后使用siRNA干扰YAP蛋白表达，Western blot检测YAP、磷酸化GSK-3β、β-catenin蛋白表达，qRT-PCR检测c-myc和CCND1的转录活性，乙酰化α-tubulin免疫荧光染色分析初级纤毛长度。结果与结论：硬性聚二甲基硅氧烷条件下的细胞增殖活性、c-myc和CCND1的转录活性显著高于软性、中等硬度聚二甲基硅氧烷，且Wnt/β-catenin通路激活程度强于软性、中等硬度聚二甲基硅氧烷；免疫荧光染色结果显示，硬性聚二甲基硅氧烷诱导了初级纤毛缩短和YAP蛋白阳性细胞增多。通过siRNA干扰YAP蛋白表达后，YAP、磷酸化GSK-3β、β-catenin蛋白表达以及c-myc和CCND1转录活性的组间差异性消失，伴随初级纤毛长度差异消失。结果表明，细胞外基质硬度通过YAP蛋白/初级纤毛新机制，直接调控骨髓基质干细胞的增殖活性。
