摘要：目的 建立同时测定重组诺如病毒疫苗原液中工艺相关杂质聚乙二醇6000（polyethylene glycol 6000， PEG6000）和吐温80（Tween 80）残留量的高效液相色谱-蒸发光散射检测器（high performance liquid chromatography-evaporative light scattering detector， HPLC-ELSD）分析方法，并对方法进行验证及初步应用。方法 通过筛选HPLC的进样量及优化ELSD的蒸发和雾化温度，建立同时测定PEG6000和Tween 80残留量的检测方法。对方法的专属性、线性和范围、定量限、准确度和精密度进行验证。用建立的方法对3批GI.1型重组诺如病毒疫苗原液和3批GII.4型重组诺如病毒疫苗原液中PEG6000和Tween 80的残留量进行检测。结果 采用NanoChrom Ghost-Remover色谱柱降低基线噪音，采用ChromCore SAA色谱柱分离目标组分，柱温为25 ℃，进样量为100 μL，ELSD蒸发温度为75 ℃，雾化温度为65 ℃，气体流速为1.60 SLM，以0.1%乙酸水溶液和0.1%乙酸异丙醇溶液为流动相进行梯度洗脱，流速为1.2 mL/min，检测时间为20 min，后运行时间为5 min。PEG6000目标峰于6.7 min左右出现，Tween 80目标峰于10.9 min左右出现，且两者相互无干扰。PEG6000和Tween 80浓度在5.000～50.000 μg/mL范围内，两者浓度的对数分别与其峰面积的对数均呈良好的线性关系，R2均＞0.990；PEG6000和Tween 80的定量限均为3.125 μg/mL；高、中、低浓度PEG6000和Tween 80对照品的回收率均在90%～115%之间；精密度验证显示，PEG6000和Tween 80的保留时间、峰高和峰面积的RSD均＜5%。3批GI.1型重组诺如病毒疫苗原液和3批GII.4型重组诺如病毒疫苗原液中PEG6000和Tween 80的残留量均低于定量限。结论 建立的方法专属性和线性良好，准确度和精密度高，可以用于重组诺如病毒疫苗原液中PEG6000和Tween 80残留量的检测。
文章目录
1 材料与方法
1.1 样品
1.2 主要试剂及仪器
1.3 溶液的制备
1.3.1 流动相
1.3.2 PEG6000对照品
1.3.3 Tween 80对照品
1.3.4 PEG6000+Tween 80混合对照品
1.4 方法的建立
1.4.1 进样量的筛选
1.4.2 ELSD蒸发和雾化温度的优化
1.4.3 检测方法
1.5 方法的验证
1.5.1 专属性
1.5.2 线性和范围
1.5.3 最低定量限
1.5.4 准确度
1.5.5 精密度
1.6 方法的初步应用
2 结 果
